Anticuerpo policlonal de conejo anti-ASC/TMS1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9ULZ3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de ASC/TMS1

• La proteína similar a un punto asociada a la apoptosis que contiene un CARD (ASC/TMS1) es un mediador clave de la apoptosis y la inflamación. Promueve la apoptosis mediada por caspasas, principalmente por la caspasa-8 y también por la caspasa-9, probablemente de manera específica según el tipo celular. Referencias relacionadas: PMID:11103777, PMID:12646168
• ASC funciona como un adaptador integral en el ensamblaje de diversos inflamasomas (NLRP1, NLRP2, NLRP3, NLRP6, AIM2 y probablemente IFI16), que reclutan y activan la caspasa-1, lo que conduce al procesamiento y la secreción de citocinas proinflamatorias. Referencias relacionadas: PMID:15030775, PMID:16982856, PMID:17349957
• A través de sus dominios pirina y CARD, ASC media interacciones homotípicas que nucleían la formación de filamentos de caspasa-1, actuando como plataforma para la polimerización de la caspasa-1 y la piroptosis de los macrófagos. Referencias relacionadas: PMID:14499617, PMID:19234215, PMID:24630722
• ASC se localiza en el citoplasma, el núcleo, el retículo endoplasmático, las mitocondrias y la membrana del aparato de Golgi; es reclutada a los inflamasomas tras su activación.
• También modula la activación transcripcional de citocinas y quimiocinas de forma independiente del inflamasoma, mediante las vías de señalización AP-1, NF-kappa-B, MAPK y caspasa-8. Referencias relacionadas: PMID:12486103, PMID:16585594
• Se expresa ampliamente a niveles bajos y se detecta en leucocitos de sangre periférica, pulmón, intestino delgado, bazo y colon; su expresión se ha confirmado a nivel proteico en células epiteliales pulmonares. Referencias relacionadas: PMID:23229815
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación y conjugación de Ubl (enlace isopeptídico); la proteína está implicada en la supresión tumoral.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los 91 aminoácidos N-terminales, incluido el dominio pirina (PYD); el anticuerpo puede reconocer tanto la proteína de longitud completa como cualquier isoforma N-terminal. Para las aplicaciones que requieran la detección de isoformas específicas, se recomienda la validación con controles adecuados.
• Para Western blot (WB), se espera una banda principal de aproximadamente 22 kDa; sin embargo, las posibles modificaciones postraduccionales o los fragmentos de escisión pueden producir bandas adicionales; deben utilizarse controles de carga y marcadores de peso molecular.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), deben optimizarse las condiciones de permeabilización y fijación, ya que ASC se localiza en múltiples compartimentos subcelulares. Los patrones de tinción nuclear y citoplasmática pueden variar según el estado de activación.
• Las aplicaciones de inmunoprecipitación (IP) y ELISA también han sido validadas; se recomienda utilizar lisados frescos e incluir inhibidores de proteasas para preservar las interacciones proteicas.
• Se ha informado de reactividad cruzada con ratón y rata; sin embargo, debe comprobarse la homología de secuencia para estudios en estas especies y se aconsejan experimentos piloto.

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