Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-ATF3 para WB - P18847

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de ATF3

• ATF3 (Activating Transcription Factor 3, Factor de transcripción activador 3) es un factor de transcripción de cremallera de leucina básica (bZIP) codificado por el gen ATF3. Se une a la secuencia consenso del elemento de respuesta a cAMP (CRE) 5'-GTGACGT[AC][AG]-3', presente en muchos promotores virales y celulares.
• Funciona como un regulador dual: reprime la transcripción desde los sitios ATF al estabilizar cofactores inhibidores en el promotor, y activa la transcripción al secuestrar estos cofactores alejándolos de los promotores.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas. La isoforma 1 actúa como represor transcripcional, mientras que una isoforma inducida por estrés contrarresta esta represión, lo que destaca su papel dinámico en la respuesta al estrés.
• Se localiza en el núcleo, donde coordina programas transcripcionales en respuesta a diversos estímulos como citoquinas, factores de crecimiento y daño en el ADN.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación y ubiquitinación (enlace isopéptido), que modulan su estabilidad, actividad e interacciones proteicas.
• Como gen clave inducible por estrés, ATF3 está implicado en procesos como la apoptosis, la regulación del ciclo celular y las respuestas inmunitarias, lo que lo vincula al cáncer, la neurodegeneración y los trastornos metabólicos.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región N-terminal (aminoácidos 1–77), por lo que puede reconocer múltiples isoformas. Valide la especificidad en las líneas celulares humanas o murinas relevantes, teniendo en cuenta el peso molecular variable (12–21 kDa) que se observa frecuentemente en Western blot debido a las diferencias entre isoformas y las modificaciones postraduccionales.
• Para Western blotting, optimice las condiciones de reducción y el porcentaje de acrilamida para resolver las bandas de proteínas pequeñas; considere el uso de geles al 15% o geles de gradiente para una mejor separación.
• En experimentos de ChIP, las condiciones de entrecruzamiento deben titularse cuidadosamente debido a la ocupación transitoria de ATF3 en los promotores; el anticuerpo puede ser adecuado para el enriquecimiento posterior a qPCR o secuenciación.
• Para IP, los protocolos estándar con lavados de baja rigurosidad pueden preservar los complejos que interactúan con ATF3.
• El rendimiento en ELISA se puede evaluar recubriendo proteína ATF3 recombinante o lisados; el anticuerpo puede usarse potencialmente como reactivo de captura o detección en un formato de inmunoensayo sándwich.

CamelBio: Tu puente de abastecimiento integral

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