Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ATF6 para WB, IHC-P, IP, ChIP y ELISA - P18850

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de ATF6

• ATF6, también conocido como factor de transcripción activador 6 alfa (ATF6-alfa), es una proteína precursora de 75 kDa anclada a la membrana del retículo endoplásmico (RE). Pertenece a la familia de factores de transcripción ATF/CREB. Referencias relacionadas: PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11779464
• Ante el estrés del RE, ATF6 se transloca al aparato de Golgi, donde es escindido y libera su dominio citoplasmático N-terminal. El fragmento procesado de ATF6 entra en el núcleo y actúa como factor de transcripción para activar los genes diana de la respuesta a proteínas desplegadas (UPR). Referencias relacionadas: PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11779464
• ATF6 se une a los elementos de respuesta al estrés del RE (ERSE) en los promotores de los genes de la UPR, y a menudo requiere la cooperación con NF-Y. Reconoce la secuencia consenso 5'-CCAC[GA]-3' dentro de los motivos ERSE. Referencias relacionadas: PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11779464
• La localización subcelular es dinámica: en condiciones basales, ATF6 se encuentra en la membrana del RE y en la membrana del aparato de Golgi; su forma activa se transloca al núcleo tras la inducción del estrés. Referencias relacionadas: PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11779464
• ATF6 se expresa de forma ubicua y se ha implicado en el desarrollo de la retina y la función de los conos, con variantes patológicas relacionadas con la acromatopsia. Referencias relacionadas: PMID:26029869
• Entre las modificaciones postraduccionales se incluyen la glucosilación y la ubiquitinación. La proteína contiene una hélice transmembrana y está sujeta a una proteólisis intramembranaria regulada.

Orientación experimental y consejos técnicos

• La proteína recombinante utilizada como inmunógeno para generar este anticuerpo monoclonal proporciona una alta especificidad por la diana; valide el anticuerpo en su sistema modelo correspondiente.
• Para el análisis mediante Western blot, se espera una banda de aproximadamente 75 kDa correspondiente al ATF6 de longitud completa; considere utilizar inhibidores de proteasas para evitar la degradación.
• En los ensayos de ChIP, optimice las condiciones de entrecruzamiento y sonicación para la unión de ATF6 nuclear; valide los resultados con genes diana de la UPR conocidos.
• La IHC-P puede requerir recuperación antigénica; pruebe métodos enzimáticos y de inducción por calor para garantizar la detección de la tinción nuclear y/o del RE.
• La reactividad cruzada con ratón permite la validación en modelos de roedores de estrés del RE; incluya siempre los controles negativos adecuados.

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