Anticuerpo Policlonal Anti-ATG12 para WB, IF/ICC, ELISA - O94817

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ATG12

• La proteína similar a ubiquitina ATG12 (también conocida como APG12-like) es un componente clave de la vía de autofagia, esencial para la formación del autofagosoma.
• ATG12 se conjuga con ATG5 a través de un sistema similar al de ubiquitina que involucra a ATG7 (similar a E1) y ATG10 (similar a E2). El conjugado ATG12-ATG5 actúa luego como una enzima similar a E3, promoviendo la lipidación de las proteínas de la familia ATG8 y su asociación a la membrana.
• El complejo ATG12-ATG5, junto con ATG16L1, es necesario para el reclutamiento de LRRK2 a lisosomas estresados y la inducción de la actividad quinasa de LRRK2 en respuesta a estrés lisosomal (Por similitud).
• Subcelularmente, ATG12 se localiza en el citoplasma y en la membrana de la estructura preautofagosómica, lo que coincide con su papel en las etapas tempranas de la autofagia.
• ATG12 se expresa de forma ubicua en todos los tejidos humanos, lo que refleja su papel fundamental en la homeostasis celular.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la acetilación y la formación de un enlace isopéptido con ATG5. El empalme alternativo produce múltiples isoformas, y se ha resuelto una estructura 3D (Identificación proteómica; Proteoma de referencia; Vía de conjugación Ubl).
• En infecciones virales, ATG12 actúa como un factor proviral: el conjugado ATG5-ATG12 regula negativamente la respuesta inmune antiviral innata al impedir la producción de IFN de tipo I después de la infección por VSV; también es necesario para la traducción del ARN del VHC entrante y el inicio de la replicación, aunque no para la infección establecida. Referencias relacionadas: PMID:17709747 PMID:19666601

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de la región N-terminal (aa 1–100) de la ATG12 humana. Considere verificar la accesibilidad del epítopo en su tipo de muestra; puede no ser necesaria la recuperación de antígeno estándar para WB.
• En Western blotting, se espera una banda de ~15 kDa para la ATG12 monomérica. El conjugado ATG12-ATG5 puede aparecer en un peso molecular mayor en condiciones no reductoras; incluya controles adecuados para distinguir las formas.
• Para inmunofluorescencia/ICC, el patrón de tinción esperado es citoplasmático y punctado (estructuras preautofagosómicas). La cotinción con marcadores de autofagia (por ejemplo, LC3) puede ayudar a confirmar la especificidad.
• Este anticuerpo policlonal presenta reactividad cruzada con la ATG12 de ratón y rata, por lo que es adecuado para estudios entre especies. Valídelo siempre en el fondo de especie correspondiente.
• Como ocurre con todos los anticuerpos policlonales, es posible que exista variabilidad entre lotes. Incluya controles positivos y negativos en cada experimento y considere realizar una titulación para obtener una relación señal-ruido óptima.

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