Anticuerpo policlonal Anti-ATG14 para WB, IF/ICC, ELISA - Q6ZNE5

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de ATG14

• ATG14 (también conocido como Atg14L o Barkor) es un regulador clave de la autofagia requerido tanto para la autofagia basal como la inducible. Funciona como parte del complejo PI3-quinasa específico de autofagia PI3KC3-C1, determinando su localización. Referencias relacionadas: PMID:18843052, PMID:19050071
• ATG14 promueve la formación de autofagosomas y la conjugación de MAP1LC3/LC3 a fosfatidiletanolamina, un paso crítico en el alargamiento del autofagosoma. Referencias relacionadas: PMID:19270696, PMID:20713597
• ATG14 promueve la translocación de BECN1 desde la red de Golgi trans a los autofagosomas. Referencias relacionadas: PMID:20713597
• ATG14 aumenta la actividad de PIK3C3 de manera dependiente de BECN1.
• ATG14 es esencial para la fosforilación dependiente de autofagia de BECN1 y estimula su fosforilación, al mismo tiempo que suprime la fosforilación de PIK3C3 mediada por AMPK. Referencias relacionadas: PMID:23878393
• Se une al complejo t-SNARE STX17-SNAP29 en los autofagosomas y lo prepara para la interacción con VAMP8, promoviendo la fusión entre autofagosoma y endolisosoma. Referencias relacionadas: PMID:25686604, PMID:37632749
• ATG14 se localiza en el citoplasma, la membrana del retículo endoplásmico, la membrana de la estructura preautofagosómica y la membrana del autofagosoma, lo que refleja su papel en la biogénesis y maduración de autofagosomas.
• ATG14 es una proteína de bobina enrollada que sufre empalme alternativo; está fosforilada y ubiquitinada, según indican los estudios de proteómica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región C-terminal (aa 340–440) de la ATG14 humana, que está conservada entre especies, lo que favorece la reactividad cruzada con ratón y rata. Se recomienda validar en el sistema de muestras correspondiente.
• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 55 kDa; se recomienda utilizar lisados de células completas o fracciones subcelulares para experimentos de inducción de la autofagia.
• Los protocolos de IF/ICC deben incluir permeabilización para detectar ATG14 localizada en membrana en autofagosomas y otros compartimentos; se recomienda utilizar controles negativos y positivos adecuados.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la optimización de la concentración del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo; incluya una curva de calibración para la evaluación cuantitativa.

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