Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-ATG4A para WB, IF/ICC, ELISA - Q8WYN0

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ATG4A

• ATG4A es una cisteína proteasa esencial para la autofagia, que media tanto la activación proteolítica como la deslipidación de las proteínas de la familia ATG8. Referencias relacionadas: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651

• La actividad proteasa de ATG4A escinde el residuo C-terminal de las proteínas ATG8 (incluyendo MAP1LC3A, GABARAP, GABARAPL2) para exponer una glicina, lo cual es necesario para su conjugación a PE y su direccionamiento a la membrana durante la autofagia. Referencias relacionadas: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651

• ATG4A cataliza la deslipidación de las proteínas de la familia ATG8 conjugadas a PE, con una actividad de deslipidación más fuerte en relación con ATG4B, contribuyendo así al reciclaje de las proteínas ATG8. Referencias relacionadas: PMID:29458288, PMID:33909989

• Funciona como una enzima similar a la desubiquitinante para contrarrestar la ATG8ilación, escindiendo ATG8 de conjugados como ATG3. Referencias relacionadas: PMID:31315929, PMID:33773106

• Independientemente de su actividad proteasa, ATG4A regula la mitofagia controlando el tráfico de ATG9A a las mitocondrias y facilitando los contactos fagóforo-retículo endoplásmico durante la transferencia de lípidos. Referencias relacionadas: PMID:33773106

• ATG4A se localiza en el citoplasma, consistente con su papel en la autofagia.

• El gen ATG4A sufre empalme alternativo, produciendo múltiples isoformas, y es identificado en estudios de proteómica.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 210–398 de ATG4A humana, una región que puede incluir dominios funcionalmente relevantes; se debe considerar la preservación del epítopo y la homología de especies al interpretar los datos de reactividad cruzada.
• Para Western blot en condiciones reductoras, se anticipa una banda cerca de 45 kDa; utilice lisados celulares o de tejido apropiados con expresión confirmada de ATG4A como controles positivos.
• En inmunofluorescencia o inmunocitoquímica, la localización citoplasmática de ATG4A debe ser detectable; optimice los protocolos de fijación y permeabilización para el tipo celular específico.
• Las aplicaciones de ELISA se pueden desarrollar utilizando proteína ATG4A recombinante o fragmentos peptídicos; las condiciones del ensayo pueden requerir optimización empírica.
• Se afirma la reactividad cruzada con ortólogos de ratón y rata; valide la especificidad en la especie objetivo utilizando modelos de knockout o knockdown cuando sea factible.

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