Anticuerpo policlonal anti-ATG4B para WB, ELISA - Q9Y4P1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ATG4B

• ATG4B, también conocida como Autofagina-1 o APG4B, es una proteasa de cisteína que desempeña un papel dual en la autofagia al mediar la activación proteolítica y la deslipidación de las proteínas de la familia ATG8. Referencias relacionadas: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• Es necesaria para la macroautofagia canónica, la autofagia no canónica y la mitofagia, lo que destaca su papel central en las vías de degradación celular. Referencias relacionadas: PMID:33773106, PMID:33909989

• ATG4B escinde específicamente el aminoácido C-terminal de las proteínas ATG8 (MAP1LC3A/B/C, GABARAP, GABARAPL1/2) para exponer un residuo de glicina necesario para la conjugación a fosfatidiletanolamina (PE) y la inserción en la membrana. Referencias relacionadas: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• Además del procesamiento proteolítico, ATG4B también actúa como una enzima similar a la desubiquitinante para eliminar ATG8 de las proteínas conjugadas (ATG8ilación), como ATG3, y cataliza la deslipidación de las proteínas ATG8 conjugadas a PE durante la autofagia. Referencias relacionadas: PMID:31315929, PMID:33773106, PMID:15187094, PMID:19322194, PMID:28633005

• Entre los parálogos de ATG4 (ATG4A-D), ATG4B es la isoforma principal para la activación proteolítica de las proteínas ATG8, pero exhibe una actividad de deslipidación más débil en comparación con las demás. Referencias relacionadas: PMID:29458288, PMID:30661429

• En la mitofagia, ATG4B puede promover el crecimiento del fagóforo de forma independiente de su actividad enzimática y la conjugación de ATG8, regulando el tráfico de ATG9A y facilitando los contactos entre el fagóforo y el retículo endoplásmico. Referencias relacionadas: PMID:33773106

• ATG4B se localiza predominantemente en el citoplasma, con asociaciones reportadas con autofagosomas, retículo endoplásmico y mitocondrias, lo que es consistente con sus funciones en autofagia y mitofagia.

• Las modificaciones postraduccionales de ATG4B incluyen acetilación, fosforilación y S-nitrosilación, que pueden regular su actividad y estabilidad.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 1–393 de la ATG4B humana; el anticuerpo resultante puede reconocer la ATG4B de longitud completa y posiblemente isoformas generadas por empalme alternativo. Valide la especificidad en el tipo de muestra previsto.
• Para Western blotting, espere una banda de aproximadamente 44 kDa en condiciones reductoras. Debido a posibles modificaciones o escisiones postraduccionales, pueden aparecer bandas adicionales; confirme con los controles apropiados.
• La expresión de ATG4B es ubicua pero puede variar; considere usar un control positivo como lisados de células HeLa o HEK293, y verifique la reducción de expresión (knockdown) si es necesario.
• Este producto está calificado para ELISA; optimice la concentración de recubrimiento y las condiciones de detección según el formato del ensayo.

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