Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-ATG4B para WB, IF, ELISA - Q9Y4P1

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ATG4B

• ATG4B (también conocido como APG4B, AUTL1, autofagina-1) es una cisteína proteasa clave que regula la autofagia al mediar el procesamiento proteolítico y la delipidación de las proteínas de la familia ATG8, esenciales para la macroautofagia, la autofagia no canónica y la mitofagia. Referencias relacionadas: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651, PMID:33773106, PMID:33909989

• Corta los aminoácidos C-terminales de los homólogos de ATG8 (MAP1LC3A/B/C, GABARAP, GABARAPL1/2) para exponer una glicina conservada, un requisito previo para su conjugación a fosfatidiletanolamina (PE) e inserción en las membranas de los autofagosomas. Referencias relacionadas: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• ATG4B también actúa como una enzima delipidante, desconjugando PE de las proteínas ATG8 para facilitar su reciclaje; además, procesa las proteínas ATG8 en estructuras de membrana única durante la autofagia no canónica. Referencias relacionadas: PMID:15187094, PMID:19322194, PMID:29458288, PMID:33909989

• En la mitofagia, ATG4B promueve el crecimiento del forisoma independientemente de su actividad proteasa al regular el tráfico de ATG9A hacia las mitocondrias y permitir los contactos retículo-forisoma para la transferencia de lípidos. Referencias relacionadas: PMID:33773106

• Entre los cuatro parálogos de ATG4 de mamíferos (ATG4A–D), ATG4B es la principal proteasa para la activación de ATG8, pero exhibe una actividad de delipidación relativamente débil en comparación con ATG4A y ATG4D. Referencias relacionadas: PMID:29458288, PMID:30661429

• A nivel subcelular, ATG4B se localiza en el citoplasma, citosol, autofagosomas, retículo endoplásmico y mitocondrias, lo que coincide con su papel multifacético en la autofagia y vías relacionadas.

• Se han reportado modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación, fosforilación, S-nitrosilación y glicación, que potencialmente regulan su actividad enzimática y distribución subcelular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido dentro de los residuos 200-300 de ATG4B humano, una región ubicada en el dominio catalítico. La reactividad del anticuerpo puede verse influenciada por modificaciones postraduccionales o estados conformacionales.
• Para la transferencia Western (Western blotting), ATG4B migra aproximadamente a 44 kDa. Los niveles endógenos pueden variar; considere el uso de inductores de autofagia (p. ej., inanición, rapamicina) para mejorar la detección.
• En aplicaciones de inmunofluorescencia, ATG4B muestra una distribución citoplasmática puntiforme que puede colocalizarse con marcadores de autofagosomas (p. ej., LC3) y marcadores mitocondriales bajo condiciones de mitofagia. Valide la especificidad en líneas celulares knockout.
• Se ha informado que el anticuerpo reacciona de forma cruzada con ATG4B de ratón y rata; sin embargo, la alineación de secuencias de la región del inmunógeno debe verificarse para otras especies.
• Las aplicaciones de ELISA pueden usarse para cuantificación; considere un formato de ELISA sándwich con un par de anticuerpos emparejados.

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