Anticuerpo Monoclonal Anti-ATG5 para WB, IF-P, IHC-P, IP, ELISA - Q9H1Y0

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ATG5

• La proteína de autofagia 5 (ATG5), también conocida como APG5-like, ASP o hAPG5, es una proteína clave relacionada con la autofagia codificada por el gen ATG5 (ID de gen: 9474) en humanos.
• ATG5 es esencial para la formación de vesículas autofágicas. Se conjugue con ATG12 a través de un sistema similar a la ubiquitina que involucra a ATG7 (similar a E1) y ATG10 (similar a E2). El conjugado ATG12-ATG5 actúa como una enzima similar a E3 para la lipidación de proteínas de la familia ATG8, facilitando su asociación con las membranas de las vesículas.
• ATG5 desempeña un papel fundamental en el control de calidad mitocondrial después del daño oxidativo, contribuyendo a la longevidad celular, y participa en el desarrollo de linfocitos, donde es esencial para la supervivencia y proliferación de células B y T.
• La proteína es necesaria para el procesamiento y presentación óptimos de antígenos a través de MHC II, el mantenimiento de la morfología axonal, la diferenciación normal de adipocitos, y promueve la ciliogénesis primaria al eliminar OFD1 de los satélites centriolares y degradar IFT20 por medio de la autofagia.
• ATG5 también puede funcionar en la apoptosis, posiblemente dentro del citoesqueleto modificado. Su expresión se upregula en células apoptóticas aguas abajo de la actividad de caspasas, y es crucial para la muerte celular autofágica inducida por IFN-gamma al interactuar con FADD.
• (Infección microbiana) ATG5 puede actuar como factor proviral: regula negativamente la respuesta inmune antiviral innata al impedir la producción de IFN de tipo I después de la infección por VSV, y es necesario para iniciar la traducción y replicación del ARN del virus de la hepatitis C. Referencias relacionadas: PMID:17709747 PMID:19666601
• A nivel subcelular, ATG5 se localiza en el citoplasma y la membrana de la estructura preautofagosómica. Se expresa de forma ubicua a nivel de ARNm, pero la proteína se expresa de forma notablemente alta en células apoptóticas.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen la acetilación y la formación de un enlace isopéptido con ATG12. La proteína se asocia con palabras clave como autofagia, apoptosis, interacción huésped-virus, inmunidad y neurodegeneración.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que comprende los aminoácidos 1-100 del ATG5 humano. Valide la especificidad utilizando líneas celulares knockout para ATG5 o el silenciamiento por siARN.
• Para la detección por Western blot (WB), se espera una banda alrededor de 32-35 kDa (monómero de ATG5; el conjugado ATG12-ATG5 migra más alto, alrededor de ~55 kDa). Considere probar en muestras con autofagia inducida (por ejemplo, ayunadas o tratadas con rapamicina) para mejorar la señal.
• En inmunofluorescencia (IF) e inmunohistoquímica (IHC), ATG5 muestra una tinción punteada citoplasmática que se acumula después de la inducción de la autofagia; optimice la fijación y permeabilización para preservar las estructuras de autofagosomas.
• Para inmunoprecipitación (IP), el anticuerpo puede capturar tanto ATG5 libre como el conjugado ATG12-ATG5; asegúrese de contar con condiciones de lisis adecuadas para detectar interacciones proteína-proteína.
• Se espera reactividad cruzada con ratón y rata según la homología de secuencia; sin embargo, verifique el rendimiento en el contexto de especie y tejido correspondiente.

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