Anticuerpo policlonal de conejo Anti-ATG7 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O95352

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de ATG7

• ATG7 es una enzima activadora tipo E1 esencial para dos sistemas de conjugación similares a la ubiquitina que impulsan la autofagia y el transporte desde el citoplasma a la vacuola (Cvt).
• Activa ATG12 para su conjugación con ATG5 y prepara a las proteínas de la familia ATG8 (como LC3) para su lipídación con fosfatidiletanolamina, un paso fundamental para la asociación con la membrana del autofagosoma.
• ATG7 facilita la conversión de LC3-I en LC3-II lipídada en las membranas de los autofagosomas, un marcador clave del flujo autofágico. Referencias relacionadas: PMID:34161705
• Más allá de la autofagia canónica, ATG7 es necesaria para la mitofagia, ayudando a mantener la homeostasis mitocondrial y prevenir la producción excesiva de especies reactivas del oxígeno (ROS).
• Modula la actividad de p53/TP53 para influir en el ciclo celular y la supervivencia en condiciones de estrés metabólico, y participa en procesos como la homeostasis axonal, el mantenimiento de las células madre hematopoyéticas, la formación de gránulos en las células de Paneth y la diferenciación adiposa.
• ATG7 también contribuye a la regulación del ritmo circadiano al mediar la degradación autofágica del represor del reloj biológico CRY1, conectando la autofagia con el reloj hepático y el metabolismo de la glucosa.
• La proteína se localiza predominantemente en el citoplasma y en las estructuras preautofagosomales, donde coordina los eventos de conjugación relacionados con la autofagia.
• ATG7 se expresa de forma generalizada, observándose los niveles más altos en riñón, hígado, ganglios linfáticos y médula ósea.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo corresponde a los aminoácidos 500–676 de la ATG7 humana, una región cercana al extremo C-terminal que se encuentra bien conservada entre mamíferos. Este diseño puede explicar la reactividad cruzada con la ATG7 de ratón y rata.
• Para Western blot (WB), se espera una banda alrededor de los 78 kDa; considere cargar una cantidad adecuada de proteína y optimizar las condiciones de transferencia para capturar la proteína de longitud completa.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), la tinción de ATG7 puede aparecer difusa en el citoplasma, con un posible enriquecimiento puntiforme en las estructuras preautofagosomales en condiciones de inducción de la autofagia. Valide los resultados con marcadores de autofagia (por ejemplo, LC3) en el tejido o modelo celular correspondiente.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede funcionar como reactivo de captura o detección; sin embargo, para obtener el mejor rendimiento se recomienda combinarlo con un anticuerpo compatible adecuado y optimizar las condiciones de recubrimiento.
• Dado el papel central de ATG7 en la autofagia, este anticuerpo puede ser útil para monitorear el flujo autofágico, la mitofagia y vías relacionadas. Incluya siempre controles adecuados (por ejemplo, inhibidores de autofagia como cloroquina) para garantizar la especificidad de la degradación autofágica.

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