Anticuerpo Policlonal Anti-ATP1A4 para WB y ELISA - Q13733

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ATP1A4

• ATP1A4 codifica la subunidad catalítica alfa-4 específica de espermatozoides de la Na+/K+-ATPasa, una bomba de iones transmembrana que acopla la hidrólisis de ATP al intercambio de 3 Na+ hacia el exterior y 2 K+ hacia el interior de la célula. Referencias relacionadas: PMID:16861705
• Esta isoforma de ATP1A4 es esencial para la motilidad espermática, la capacitación y la fertilidad masculina al mantener los gradientes iónicos necesarios para la función flagelar y la señalización celular (Por similitud).
• La proteína es un componente integral de la membrana celular, acorde con su función de transportador ATPasa de tipo P, y contiene al menos una hélice transmembrana y un dominio de unión a ATP (Palabras clave).
• La expresión de ATP1A4 está muy restringida al testículo; se detecta la proteína en altos niveles en espermatozoides maduros y solo se encuentran trazas de ARNm en el músculo esquelético. Referencias relacionadas: PMID:16175638, PMID:16861705
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación; la proteína requiere Mg2+ para su actividad enzimática, y se une a ATP y a los cationes transportados Na+ y K+ (Palabras clave).
• El empalme alternativo de ATP1A4 produce múltiples isoformas, que pueden presentar regulación tejido-específica o dependiente del desarrollo (Palabras clave).
• El gen ATP1A4 pertenece a la familia ATP1A de subunidades alfa de la Na+/K+-ATPasa, que también incluye formas expresadas de forma ubicua como ATP1A1.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1-90) de la ATP1A4 humana, por lo que el anticuerpo puede reconocer de forma preferente el extremo N-terminal de la proteína de longitud completa; tenga esto en cuenta al diseñar ensayos de bloqueo de epítopos o competición.
• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 114 kDa en muestras de testículo o espermatozoides maduros; valide el anticuerpo en el sistema de muestras correspondiente (por ejemplo, lisados de testículo de humano, ratón o rata) debido a la reactividad cruzada reportada.
• Al usar ELISA, el anticuerpo se puede emplear para la captura o detección de antígeno; realice titulaciones en tablero de ajedrez estándar para determinar las concentraciones de trabajo óptimas para su formato de ensayo específico.
• Dada la expresión restringida de ATP1A4, asegúrese de incluir muestras de control negativo (por ejemplo, tejido no testicular o líneas celulares) para confirmar la especificidad.
• El anticuerpo se suministra como policlonal de conejo, que puede presentar variabilidad entre lotes; es recomendable reservar un lote de referencia para estudios de reproducibilidad a largo plazo.

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