Anticuerpo policlonal de conejo Anti-ATP5C1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P36542

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ATP5C1

• ATP5C1 (subunidad gamma de la F1 de la ATP sintasa) es una subunidad esencial de la ATP sintasa mitocondrial F1F0 (Complejo V), la enzima responsable de la síntesis de ATP a partir de ADP y fosfato inorgánico utilizando la fuerza motriz de protones a través de la membrana mitocondrial interna. Referencias relacionadas: PMID:37244256
• Esta proteína existe en dos isoformas principales: la isoforma cardíaca, expresada predominantemente en el músculo cardíaco y esquelético, y la isoforma hepática, expresada en cerebro, hígado, riñón, piel, intestino, estómago y aorta, lo que refleja las demandas energéticas específicas de cada tejido.
• Como subunidad gamma del eje central, ATP5C1 acopla la rotación impulsada por el flujo de protones en el dominio de membrana F0 a los cambios conformacionales en el cabeza catalítica F1, lo que permite la síntesis de ATP. También desempeña un papel indispensable en el ensamblaje del núcleo catalítico F1, como se demuestra por su requerimiento para la formación de un intermediario clave de ensamblaje de F1. Referencias relacionadas: PMID:29499186
• ATP5C1 se localiza en la membrana mitocondrial interna y contiene un péptido de tránsito N-terminal que dirige su importación mitocondrial. Está sujeta a modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación y fosforilación, que pueden regular su actividad o ensamblaje.
• El peso molecular predicho de ATP5C1 es de aproximadamente 33 kDa (32996 Da según UniProt), lo que coincide con la banda observada en Western blot.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo corresponde a los aminoácidos 26-298 de la ATP5C1 humana (NP_001001973.1), que abarcan la mayor parte de la proteína madura después de la escisión del péptido de tránsito mitocondrial; por lo tanto, se espera que el anticuerpo detecte la forma madura endógena (aproximadamente 33 kDa) en Western blot.
• Para aplicaciones de Western blot (WB), se recomienda utilizar lisados de proteínas enriquecidos en mitocondrias de líneas celulares o tejidos (como corazón, músculo esquelético o hígado) que expresen ATP5C1, e incluir marcadores de peso molecular adecuados para confirmar la banda de 33 kDa.
• Al aplicar este anticuerpo en inmunohistoquímica (IHC) o inmunofluorescencia (IF), se puede observar una señal fuerte en tejidos con alto contenido mitocondrial, como el corazón y el músculo esquelético; la co-tinción con marcadores mitocondriales puede ayudar a verificar la localización.
• Se informa que el anticuerpo reacciona con la ATP5C1 de humano, ratón y rata; sin embargo, debido a posibles diferencias de secuencia entre especies, es recomendable validar la reactividad cruzada en el sistema de muestra correspondiente antes de realizar experimentos a gran escala.
• Para aplicaciones de ELISA e IF/ICC, se recomienda realizar una titulación para determinar la dilución de trabajo óptima para el tipo de muestra específico y las condiciones experimentales.

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