Anticuerpo Policiano Anti-ATP6V1E1 para WB, IF/ICC, ELISA - P36543

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ATP6V1E1

• ATP6V1E1 codifica la subunidad E 1 de la ATPasa protónica de tipo V, también conocida como subunidad de 31 kDa de la V-ATPasa (p31), subunidad E 1 de la bomba protónica vacuolar y ATP6E/ATP6E2. El empalme alternativo puede generar múltiples isoformas.
• Como subunidad del complejo V1 periférico de la V-ATPasa, participa en la hidrólisis de ATP para impulsar la translocación de protones a través de las membranas, acidificando así compartimentos intracelulares como lisosomas, endosomas y vesículas secretoras (PubMed:32001091, PubMed:33065002). Referencias relacionadas: PMID:32001091 PMID:33065002
• La V-ATPasa también se localiza en la membrana plasmática en ciertos tipos de células, contribuyendo a la acidificación extracelular y la regulación del pH (PubMed:32001091). Referencias relacionadas: PMID:32001091
• El complejo V-ATPasa actúa como activador de mTORC1 en las membranas lisosomales al facilitar la actividad del factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) del complejo Ragulator, promoviendo así el reclutamiento de mTORC1 y la señalización anabólica (PubMed:22053050, PubMed:39695235). Referencias relacionadas: PMID:22053050 PMID:39695235
• Subcelularmente, ATP6V1E1 se encuentra en la membrana celular apical, membranas de vesículas citoplasmáticas (vesículas sinápticas, vesículas recubiertas de clatrina) y membrana lisosomal.
• La proteína se expresa de forma ubicua, con niveles altos en riñón (particularmente en la nefrona distal), piel y detección generalizada en todos los tejidos (PubMed:29993276, PubMed:12036578, PubMed:28065471). Referencias relacionadas: PMID:29993276 PMID:12036578 PMID:28065471
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, según indican estudios de proteómica, lo que puede regular su ensamblaje o actividad.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 77-226 de la ATP6V1E1 humana, una región que está bien conservada entre especies, lo que respalda la reactividad cruzada observada con ratón y rata.
• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 26 kDa. Utilice controles positivos apropiados como lisados de tejido de HeLa o riñón, y considere incluir un control negativo.
• En inmunofluorescencia/ICC, el anticuerpo debe reconocer la V-ATPasa en estructuras vesiculares y posiblemente en la membrana plasmática. Se recomienda optimizar las condiciones de permeabilización y fijación para cada tipo de célula.
• Para aplicaciones de ELISA se puede utilizar el inmunógeno recombinante o fragmentos de péptido como antígeno de recubrimiento; se aconseja una prevalidación del anticuerpo en el formato de ensayo elegido.
• Como anticuerpo policlonal, puede detectar múltiples isoformas derivadas del empalme alternativo; esta propiedad puede ser ventajosa para detectar niveles totales de ATP6V1E1.
• Aunque el proveedor indica reactividad cruzada con ratón y rata, se recomienda una validación individual en su sistema de muestra específico debido a posibles variaciones específicas de especie en la accesibilidad del antígeno.

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