Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-ATP7A para WB y ELISA - Q04656

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ATP7A

• ATP7A, también conocida como bomba de cobre 1 o proteína asociada a la enfermedad de Menkes, es una ATPasa transportadora de cobre 1 codificada por el gen ATP7A en humanos.
• Funciona como una bomba de cobre (Cu⁺) impulsada por ATP, crucial para la homeostasis intracelular de iones de cobre, adquiriendo Cu⁺ de donantes citoplasmáticos y entregándolo a través de las membranas. Referencias relacionadas: PMID:10419525 PMID:11092760 PMID:28389643
• El ciclo catalítico acopla la hidrólisis de ATP con la translocación de cobre, involucrando una fosforilación transitoria y un cambio conformacional de estado orientado hacia el interior a estado orientado hacia el exterior. Referencias relacionadas: PMID:10419525 PMID:19453293 PMID:19917612
• Bajo condiciones bajas de cobre citosólico, ATP7A se localiza en la red del trans-Golgi para suministrar Cu⁺ a cuproenzimas de la vía secretora; ante el aumento de cobre, se relocaliza a la membrana plasmática para exportar el exceso de cobre. Referencias relacionadas: PMID:11092760 PMID:28389643 PMID:10419525
• En las neuronas, ATP7A regula la efusión de cobre y la transmisión sináptica, y suministra Cu⁺ a enzimas como PAM, TYR y SOD3, desempeñando un papel dual en la función y supervivencia neuronal. Referencias relacionadas: PMID:28389643
• En los melanosomas, proporciona el cofactor de cobre a la tirosinasa (TYR) para la biosíntesis de melanina.
• ATP7A se expresa ampliamente, incluyendo en corazón, cerebro, pulmón, músculo, riñón y páncreas, y a niveles más bajos en la placenta; también se encuentra en fibroblastos y células endoteliales vasculares.
• La proteína sufre splicing alternativo y está sujeta a modificaciones postraduccionales como fosforilación y glicosilación, con roles en varios compartimentos celulares incluyendo el Golgi, la membrana, los endosomas y las sinapsis.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se genera contra una proteína de fusión recombinante correspondiente a la región N-terminal (aminoácidos 1-79) de la ATP7A humana. Considere verificar la especificidad mediante análisis de Western blot utilizando líneas celulares o lisados de tejidos que se sepa que expresan ATP7A.
• Para Western blot (WB), se predice que ATP7A corra a aproximadamente 163 kDa; sin embargo, la especificación del producto nota un rango amplio de 11-172 kDa, posiblemente reflejando isoformas o productos de degradación. Optimice el porcentaje de gel y las condiciones de transferencia en consecuencia, e incluya inhibidores de proteasas apropiados.
• Se ha reportado reactividad cruzada con ATP7A de rata; valide el rendimiento en muestras de rata si se desea la detección entre especies.
• Para aplicaciones de ELISA, considere probar un rango de diluciones de anticuerpo y emplear controles positivos y negativos apropiados.
• Dado que ATP7A es una proteína transmembrana, la elección del tampón de lisis (p. ej., RIPA) y la preparación de la muestra (con o sin calentamiento) pueden influir en la detección. Determine empíricamente las condiciones óptimas.

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