Anticuerpo Policlonal Anti-ATR para WB, IHC-P, ELISA - Q13535

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ATR

• ATR es una proteína quinasa serina/treonina que reconoce la secuencia consenso de sustrato [ST]-Q, activando la señalización del punto de control tras daño en el ADN (PubMed:10597277, PubMed:10608806, PubMed:10859164).
  Referencias relacionadas: PMID:10597277, PMID:10608806, PMID:10859164

• ATR fosforila varios dianas downstream entre las que se incluyen BRCA1, CHEK1, MCM2, RAD17, RBBP8, RPA2, SMC1 y p53/TP53, inhibiendo de este modo la replicación del ADN y la mitosis, a la vez que promueve la reparación del ADN y la apoptosis (PubMed:11114888, PubMed:11418864, PubMed:11865061).
  Referencias relacionadas: PMID:11114888, PMID:11418864, PMID:11865061

• Fosforila la variante de histona H2AX en la Ser-139 en los sitios de daño del ADN, regulando la respuesta al daño en el ADN (PubMed:11673449).
  Referencias relacionadas: PMID:11673449

• Requerido para la ubiquitinación de FANCD2 y es crítico para el mantenimiento de la estabilidad de los sitios frágiles y la regulación eficiente de la duplicación de los centrosomas (PubMed:15314022, PubMed:12526805).
  Referencias relacionadas: PMID:15314022, PMID:12526805

• Actúa como regulador de la transición S-G2 al restringir la actividad de CDK1 durante la fase S para evitar la entrada prematura en G2 (PubMed:30139873).
  Referencias relacionadas: PMID:30139873

• Se localiza en la envoltura nuclear y actúa como sensor de estrés mecánico, mediando la señalización del punto de control a través de la fosforilación de CHEK1; también promueve la ruptura de la envoltura nuclear en respuesta al daño del ADN al fosforilar LMNA en la Ser-282 (PubMed:25083873, PubMed:37832547).
  Referencias relacionadas: PMID:25083873, PMID:37832547

• Participa en la respuesta inflamatoria a la inestabilidad genómica: se localiza en micronúcleos y fosforila LMNA en la Ser-395, preparándola para la fosforilación mediada por CDK1, lo que conduce a la ruptura de la envoltura micronuclear y la activación de la vía cGAS-STING y la respuesta de interferón tipo I (PubMed:37788673).
  Referencias relacionadas: PMID:37788673

• Se expresa de forma ubicua con los niveles más altos en testículo; la isoforma 2 se encuentra en páncreas, placenta e hígado, pero no en corazón, testículo y ovario.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 400–500 de ATR humano, una región implicada en interacciones proteína-proteína; el suero policlonal puede reconocer múltiples epitopos dentro de este fragmento.
• Para Western blotting, se espera una banda específica a ~301 kDa; utilice un marcador de peso molecular grande, un gel de SDS-PAGE de bajo porcentaje (6%) y una transferencia húmeda prolongada para mejorar la resolución y la eficiencia de transferencia.
• Valide la reactividad cruzada con ATR de ratón y rata comparando lisados de controles positivos; la identidad de secuencia es alta, pero confírmela con líneas celulares o tejidos conocidos.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), realice la recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón de citrato, pH 6.0) e incluya un control sin anticuerpo primario o péptido de bloqueo para evaluar la especificidad de la tinción.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de detección; el emparejamiento con un anticuerpo de captura contra un epitopo distante puede mejorar el rendimiento del ensayo; valídelo con estándares de proteína recombinante.

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