Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Bak para WB, ELISA - Q16611

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Bak

• Bak (antagonista/asesino homólogo de Bcl-2), también conocido como regulador de la apoptosis BAK o Bcl2-L-7, es un miembro proapoptótico de la familia de proteínas Bcl-2.
• Codificado por el gen BAK1 (ID de Gen: 578), desempeña un papel fundamental en la vía mitocondrial intrínseca de la apoptosis.
• Ante estímulos apoptóticos, Bak se oligomeriza y forma poros en la membrana externa mitocondrial (MOM), lo que conduce a la permeabilización y la liberación de factores apoptogénicos como el citocromo c hacia el citosol.
• Esta liberación desencadena la activación de la caspasa 9 y de las caspasas efectoras posteriores, ejecutando el programa de muerte celular.
• Bak se localiza principalmente en la membrana externa mitocondrial, lo cual es coherente con su función en la regulación de la apoptosis.
• Se expiende ampliamente en los tejidos humanos, con los niveles más altos de expresión en el corazón y el músculo esquelético.
• Las modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación y la unión al zinc, pueden regular la actividad de Bak, y el empalme alternativo genera múltiples isoformas.
• La proteína interactúa con factores del huésped durante la infección viral, lo que destaca su función en las interacciones huésped-virus.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 1-100 del extremo N-terminal de Bak humano; se espera que reconozca la proteína endógena de longitud completa de Bak.
• Para la transferencia Western (Western blotting), el peso molecular predicho es de ~23 kDa; considere el uso de fracciones enriquecidas en mitocondrias o lisados de control positivo de corazón o músculo esquelético, donde la expresión de Bak es más alta.
• Al realizar ELISA, titre el anticuerpo para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento y detección, y valide la especificidad utilizando proteína recombinante de Bak o ensayos de competición con péptidos.
• Se informa reactividad cruzada con ratón; sin embargo, valídelo en su sistema de muestra específico, ya que la detección puede variar según la preparación de la muestra y la accesibilidad del epítopo.
• Dado que Bak es una proteína de membrana mitocondrial, asegure el uso de tampones de lisis y condiciones de desnaturalización adecuados para exponer el epítopo.

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