Anticuerpo policlonal anti-Bcl-2 para WB, IP, ELISA - P49950

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de Bcl-2

• Bcl-2, codificada por el gen Bcl2, es una proteína antiapoptótica clave que suprime la muerte celular programada en diversos sistemas celulares, incluidas las células linfohematopoyéticas y neurales dependientes de factores.
• Regula la muerte celular mediante el control de la permeabilidad de la membrana mitocondrial, funcionando en un circuito de retroalimentación con las caspasas. Inhibe la actividad de las caspasas al impedir la liberación del citocromo c desde las mitocondrias o al unirse al factor activador de la apoptosis APAF-1.
• Además de la apoptosis, Bcl-2 actúa como inhibidor de la autofagia: interactúa con BECN1 y AMBRA1 en condiciones sin privación de nutrientes para suprimir la función autofágica.
• También puede atenuar la inflamación al impedir la activación del inflamasoma NLRP1, reduciendo así la activación de CASP1 y la liberación de IL1B.
• A nivel subcelular, Bcl-2 se localiza en la membrana externa mitocondrial, la membrana nuclear, la membrana del retículo endoplasmático y el citoplasma.
• La expresión tisular es amplia, con los niveles más altos en los tejidos reproductivos. En el cerebro adulto, se encuentra en las células mitrales del bulbo olfatorio, las neuronas granulares y piramidales del hipocampo, los núcleos pontinos, las neuronas granulares del cerebelo y las células ependimarias; la expresión cerebral prenatal es mayor en el neuroepitelio y la placa cortical.
• La proteína tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 26,6 kDa y está sujeta a modificaciones postraduccionales como la fosforilación y la ubiquitinación (conjugación de Ubl).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno incluye un péptido sintético correspondiente a los residuos 1–100 de Bcl-2 de rata, lo que sugiere que el anticuerpo reconoce la región N-terminal. Esta región puede estar conservada entre especies; la reactividad cruzada con ratón está confirmada, pero la prueba en especies adicionales debe validarse.
• Para Western blot (WB), cargue lisados de controles positivos adecuados, por ejemplo, de tejidos o células de rata o ratón que expresen Bcl-2, y espere una banda de aproximadamente 26 kDa. Normalmente se utilizan condiciones reductoras, pero puede ser necesaria una optimización.
• Para la inmunoprecipitación (IP), ajuste la cantidad de anticuerpo e incluya controles de isotipo pertinentes. La preclara de los lisados puede reducir la unión inespecífica.
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o detección; valide su compatibilidad con un anticuerpo secundario adecuado para el formato de su ensayo.
• Incluya siempre controles negativos apropiados para evaluar la especificidad y considere realizar pruebas en el sistema endógeno de interés.

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