Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Beclin 1 (Validado por KO) para WB y ELISA - Q14457

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Beclin 1

• Beclin-1 desempeña un papel central en la autofagia como una subunidad central del complejo de fosfoinosítido 3-cinasa de clase III (PI3K), mediando la formación de fosfoinosítido 3-fosfato; formas complejas distintas (PI3KC3-C1 y PI3KC3-C2) impulsan la iniciación y maduración del autofagosoma, respectivamente (PubMed:18570871, PubMed:21358617, PubMed:23184933).
  Referencias relacionadas: PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933

• También participa en el tráfico endocítico degradativo, endocitosis y la etapa de abscisión de la citocinesis, probablemente en el contexto de PI3KC3-C2 (PubMed:20208530, PubMed:20643123, PubMed:23974797, PubMed:25275521).
  Referencias relacionadas: PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797 PMID:25275521

• Beclin-1 se localiza ampliamente en el citoplasma, aparato de Golgi, membrana de la red trans-Golgi, membrana endosomal, membrana del retículo endoplasmático, membrana mitocondrial, autofagosomas y el núcleo, lo cual es consistente con sus diversas funciones de tráfico y señalización.

• Un fragmento C-terminal de 35 kDa (Beclin-1-C) se localiza específicamente en las mitocondrias, donde puede promover la apoptosis al inducir la translocación de BAX y la liberación de factores proapoptóticos.

• Contribuye a la defensa antiviral del huésped; por ejemplo, protege contra la infección por una cepa neurovirulenta del virus Sindbis.

• La expresión de Beclin-1 es ubicua, lo que destaca su papel fundamental en la homeostasis celular.

• La proteína está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y ubiquitinación (como se indica por las palabras clave: Fosfoproteína, Acetilación, Conjugación Ubl, Enlace isopeptídico), modulando su actividad en la autofagia y la apoptosis.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los 280 aminoácidos N-terminales, cubriendo dominios funcionales críticos; este diseño puede permitir la detección tanto de Beclin-1 de longitud completa (~52 kDa) como de la isoforma mitocondrial de 35 kDa en algunos contextos.
• Para la transferencia Western (Western blotting), considere usar lisados de células enteras de células humanas, de ratón o de rata. Aunque el peso molecular predicho es de 52 kDa, la banda puede aparecer cerca de 60 kDa debido a modificaciones postraduccionales; valide con controles de knockout cuando estén disponibles.
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo se puede usar para ELISA directo o de captura; las diluciones de trabajo óptimas deben determinarse empíricamente con la matriz de muestra relevante.
• Dado que la expresión de Beclin-1 puede ser inducida por estímulos de autofagia, incluir controles positivos (por ejemplo, células tratadas con inanición o rapamicina) puede ayudar en la validación del ensayo.

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