Anticuerpo policlonal anti-beta 2 microglobulina para WB, IHC-P, ELISA - P61769

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la beta 2 microglobulina

• La beta-2-microglobulina (B2M) es la cadena ligera del complejo mayor de histocompatibilidad de clase I (MHC I), esencial para presentar antígenos peptídicos a las células T CD8+, por lo que desempeña un papel fundamental en la inmunidad adaptativa.
• Es una proteína secretada que también se encuentra en la superficie celular asociada de forma no covalente con la cadena pesada del MHC I; su plegamiento y ensamblaje son fundamentales para una expresión estable del MHC I.
• La proteína EsxA exógena de Mycobacterium tuberculosis se une a B2M y reduce su exportación a la superficie celular, lo que podría afectar a la presentación de antígenos de clase I (PubMed:25356553).
  Referencias relacionadas: PMID:25356553
• Estructuralmente, la B2M contiene un dominio similar a las inmunoglobulinas y se estabiliza mediante un enlace disulfuro intramolecular (Cys25-Cys80). Es una glicoproteína que experimenta modificaciones postraduccionales, incluida la glicación y la formación de piroglutamato N-terminal.
• Las mutaciones en B2M están relacionadas con la hipoproteinemia hipercatabólica familiar y la amiloidosis, en las que puede formar depósitos fibrilares en los tejidos, especialmente en la amiloidosis relacionada con la diálisis.
• A pesar de su pequeño tamaño (aproximadamente 13,7 kDa teóricos), la beta-2-microglobulina migra aproximadamente a 14 kDa en SDS-PAGE en condiciones reductoras.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la forma madura secretada (aminoácidos 21-119), excluyendo el péptido señal; el anticuerpo puede reconocer tanto la B2M reducida como la no reducida, pero para obtener resultados consistentes, valide en condiciones desnaturalizantes y reductoras (por ejemplo, calentamiento a 95 °C con DTT) para romper los enlaces disulfuro.
• Para Western blot, cargue 10-30 µg de lisado celular total o suero concentrado y utilice un control positivo, como tejido rico en linfocitos (bazo, ganglio linfático) o líneas celulares que expresen MHC I.
• En inmunohistoquímica de secciones fijadas con formalina e incluidas en parafina (IHC-P), realice la recuperación antigénica con tampón de citrato (pH 6,0) o tampón de EDTA (pH 9,0) y considere realizar un experimento de titulación para optimizar la intensidad de la tinción.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con la B2M de ratón y rata, por lo que es adecuado para modelos de roedores; verifique la homología de secuencia y analice lisados de tejidos relevantes para confirmar la reactividad entre especies.
• Para ELISA, puede utilizarse como anticuerpo de captura o de detección; combinarlo con otro clon que reconozca un epítopo diferente puede mejorar la sensibilidad en ensayos tipo sándwich. Optimice los tampones de recubrimiento y los factores de dilución.
• Debido a la secreción de B2M, pueden analizarse muestras sin células; para dianas de baja abundancia, puede ser necesario realizar un enriquecimiento mediante inmunoprecipitación o concentración.

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