Anticuerpo Monoclonal Anti-BMAL1 para WB, ELISA - O00327

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de BMAL1

• BMAL1 (Proteína 1 similar a ARNT de hélice-bucle-hélice básica) es un activador transcripcional que forma un heterodímero con CLOCK o NPAS2 para activar la transcripción de genes que contienen elementos de caja-E, sirviendo como un componente positivo central del reloj circadiano.
• El reloj molecular circadiano consiste en bucles de retroalimentación de transcripción/traducción interconectados; los heterodímeros CLOCK/NPAS2-BMAL1 activan los genes del período (PER) y la criptocroma (CRY), cuyos productos proteicos reprimen la actividad de CLOCK/NPAS2-BMAL1, generando oscilaciones de ~24 horas en la expresión génica.
• El heterodímero CLOCK-BMAL1 se une preferentemente al motivo de caja-E 5'-CACGTGA-3', con BMAL1 reconociendo el medio sitio 3' 5'-GTGA-3'; también reconoce motivos no canónicos 5'-AACGTGA-3' y 5'-CATGTGA-3'. Referencias relacionadas: PMID:23229515
• BMAL1 regula positivamente la miogénesis y negativamente la adipogénesis a través de genes de la vía Wnt; en las células beta pancreáticas, controla la secreción de insulina estimulada por glucosa a través de la expresión de genes antioxidantes mediada por NRF2, y regula negativamente la señalización de mTORC1.
• Promueve la apertura rítmica de la cromatina y es esencial para la interacción rítmica de CLOCK con ASS1, regulando positivamente la acetilación de ASS1 mediada por CLOCK. Referencias relacionadas: PMID:28985504
• Funciones adicionales incluyen la regulación de la neurogénesis del hipocampo adulto, el control diurno del metabolismo del músculo esquelético (a través de DGAT2 y COQ10B) y el reclutamiento rítmico de monocitos inflamatorios Ly6C a través de la expresión de quimiocinas mediada por PRC2.
• Se localiza en el núcleo, el citoplasma y los cuerpos de PML; está sujeto a modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, acetilación y ubiquitinación (formación de enlaces isopeptídicos).
• Altamente expresado en el cerebro adulto, el músculo esquelético, el corazón y los folículos pilosos; también está implicado en la regulación de la entrada y replicación del SARS-CoV-2 en células epiteliales pulmonares.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 500–600 de BMAL1 humano; considere que los epítopos pueden residir en regiones variables o conservadas. Valide la reactividad cruzada de especies en su contexto experimental específico.
• Para Western blot (WB), el peso proteico predicho es de ~69 kDa; verifique la preparación adecuada de la muestra y los controles de carga. La reactividad de especies está confirmada para humano, ratón y rata.
• Para aplicaciones de ELISA, optimice el antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo utilizando titulaciones estándar en tablero de ajedrez. Tenga en cuenta que los detalles del protocolo (ELISA directo, indirecto, sándwich) deben establecerse empíricamente.
• Dada la naturaleza circadiana de la expresión de BMAL1, considere los efectos del momento de recolección al diseñar experimentos.

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