Anticuerpo Policlonal Anti-Bmi1 para WB, IF/ICC, ELISA - P35226

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Bmi1

• La proteína del complejo Polycomb BMI-1 (también conocida como PCGF4, RNF51) es un componente central del complejo represivo Polycomb 1 (PRC1), que mantiene la represión transcripcional de genes clave del desarrollo, incluidos los clústeres Hox, a través de la remodelación de la cromatina y modificaciones de histonas.
• Dentro del complejo PRC1, BMI-1 colabora con RNF2/RING2 para catalizar la monoubiquitinación de la histona H2A en Lys-119 (H2AK119ub), una marca epigenética crítica para el silenciamiento génico estable. Referencias relacionadas: PMID:15386022, PMID:16359901, PMID:16714294
• El complejo ternario RNF2-UB2D3-BMI1 se une específicamente a los nucleosomas y ejerce su actividad de ligasa de ubiquitina E3 únicamente sobre la histona H2A nucleosomal, lo que destaca su función dirigida a la cromatina. Referencias relacionadas: PMID:21772249, PMID:25355358
• BMI-1 actúa como un regulador positivo de la actividad de ligasa de ubiquitina de RNF2, mejorando así la ubiquitinación de H2A mediada por PRC1 y reforzando la represión transcripcional mediada por Polycomb. Referencias relacionadas: PMID:21772249, PMID:26151332
• La localización subcelular es predominantemente nuclear, lo que es coherente con su función en la regulación de la cromatina, aunque también se ha observado una distribución citoplasmática bajo ciertas condiciones (UniProt: UBICACIÓN SUBCELULAR).
• BMI-1 se clasifica como un protooncogén y regulador de la cromatina, y presenta un dominio de dedo RING que coordina iones de zinc esenciales para su integridad estructural y función (UniProt: PALABRAS CLAVE).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 120-326 de BMI-1 humana, una región central que puede producir anticuerpos que reconozcan múltiples conformaciones o estados de interacción; valide la especificidad en el sistema de muestra relevante.
• Para la transferencia Western (Western blotting), el peso molecular predicho es de aproximadamente 37 kDa; considere el uso de un control de carga de tamaño similar y optimice las condiciones de lisis para preservar la integridad de la proteína.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, los protocolos de fijación y permeabilización pueden afectar la accesibilidad del antígeno; probar diferentes métodos (p. ej., metanol frente a formaldehído) puede mejorar la tinción nuclear.
• El rendimiento de ELISA puede verificarse utilizando el inmunógeno recombinante como control positivo; incluya controles negativos apropiados para evaluar la unión de fondo.
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal, se debe controlar la coherencia entre lotes al cambiar entre batches, y puede ser necesaria una reoptimización de los factores de dilución.

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