Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-BRD4 para WB, IHC-P, ELISA - O60885

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de BRD4

• BRD4 (Proteína que contiene dominio bromodominio 4, también conocida como HUNK1) es una proteína lectora de cromatina que reconoce histonas acetiladas, desempeñando un papel clave en la transmisión de la memoria epigenética a través de las divisiones celulares.
  Referencias relacionadas:
  PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504
• Permanece asociada con la cromatina acetilada durante todo el ciclo celular para preservar el estado de la cromatina y mantener la estructura de orden superior, proporcionando memoria para la transcripción génica postmitótica.
  Referencias relacionadas:
  PMID:22334664 PMID:23317504 PMID:23589332
• Durante la interfase, BRD4 regula la transcripción génica inducible por señales reclutando el complejo P-TEFb a los promotores y potenciadores distales, colaborando con JMJD6 para activar P-TEFb y promover la fosforilación de la CTD de la ARN polimerasa II.
  Referencias relacionadas:
  PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240
• BRD4 también promueve la fosforilación de 'Ser-2' de la CTD de la ARN polimerasa II, ya sea mediante el reclutamiento de P-TEFb o a través de una actividad quinasa intrínseca reportada que requiere más evidencia in vivo.
  Referencias relacionadas:
  PMID:23086925 PMID:22509028
• Reconoce RELA acetilada, mejorando la activación transcripcional de NF-kappa-B al reclutar el complejo P-TEFb.
  Referencias relacionadas:
  PMID:19103749
• BRD4 funciona como un aislante de cromatina en la respuesta al daño del ADN, reclutando el complejo condensina-2 a las histonas acetiladas y limitando la propagación de la fosforilación de H2AX.
• A nivel subcelular, BRD4 se localiza en el núcleo y se asocia con los cromosomas.
• Se expresa de manera ubicua en los tejidos y está sujeta a modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación y acetilación; contiene bromodominios y está implicado en interacciones huésped-virus y variantes de la enfermedad.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético dentro de los aminoácidos 100-200 del BRD4 humano, lo que sugiere que el anticuerpo puede reconocer un epítopo en esta región N-terminal.
• Para la transferencia Western (WB), el peso molecular predicho es de ~152 kDa; considere usar un porcentaje de gel apropiado y tiempos de transferencia extendidos para proteínas de tan alto peso molecular. Valide con controles positivos y negativos en el sistema de muestra relevante.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), las condiciones de recuperación de antígenos (por ejemplo, tampón de citrato o EDTA, inducida por calor) pueden optimizarse para su tipo de tejido específico. Dado que BRD4 se expresa de manera ubicua, incluya controles de tejido adecuados.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; se recomienda emparejarlo con anticuerpos apropiados y validar con proteína BRD4 recombinante o lisados celulares.

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