Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-BRIP1 para WB y ELISA - Q9BX63

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de BRIP1

• BRIP1 codifica la proteína del grupo J de anemia de Fanconi (FANCJ), también conocida como helicasa 1 asociada al extremo C de BRCA1 (BACH1) y proteína interactuante con BRCA1 1. Pertenece a la familia de helicasas DEAH y contiene un dominio de clúster de hierro-azufre 4Fe-4S crítico para su actividad de helicasa.
• Funciona como una ATPasa dependiente de ADN y una helicasa de ADN 5'-3' que mantiene la estabilidad cromosómica resolviendo estructuras secundarias de ADN durante la replicación y la reparación. Referencias relacionadas: PMID:11301010 PMID:14983014 PMID:16116421
• Desempeña un papel clave en la vía de anemia de Fanconi (FA), actuando río abajo de la ubiquitinación de FANCD2 para reparar entrecruzamientos interhebras de ADN. Facilita la reparación por recombinación homóloga de roturas de doble hebra de ADN a través de su interacción con BRCA1. Referencias relacionadas: PMID:14983014 PMID:16153896
• Elimina entrecruzamientos ADN-proteína asociados a sitios abásicos en las horquillas de replicación mediante el desplegamiento impulsado por helicasa de los aductos de HMCES, permitiendo la escisión mediada por SPRTN y la resolución de lesiones. Referencias relacionadas: PMID:16116421 PMID:36608669
• Desenrolla híbridos de ARN:ADN y estructuras de ADN de cuádruplex G (G4); el desenrollamiento de G4 requiere una cola de ADN monocatenario 5′, lo que indica especificidad por sustratos asociados a la replicación. Referencias relacionadas: PMID:14983014 PMID:18426915 PMID:20639400
• Se localiza tanto en el núcleo como en el citoplasma, con expresión ubicua y los niveles más altos en los testículos. Sufre modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación y acetilación, y las mutaciones en BRIP1 están relacionadas con la anemia de Fanconi y la predisposición al cáncer.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los 260 aminoácidos del extremo N-terminal de BRIP1, lo que puede reconocer la longitud completa y posibles isoformas del extremo N-terminal. Verifique la especificidad utilizando los controles adecuados o modelos de knockdown/knockout.
• Para Western blotting, BRIP1 tiene un peso molecular predicho de ~141 kDa. Optimice las condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular y cargue suficiente proteína (p. ej., 30–50 µg de extracto nuclear) debido a la típicamente baja expresión endógena.
• En aplicaciones de ELISA, utilice proteína BRIP1 recombinante (p. ej., fragmento inmunógeno) como antígeno de recubrimiento positivo y valide la linealidad/rango dinámico con diluciones seriadas.
• Los agentes dañinos del ADN (p. ej., mitomicina C o cisplatino) pueden aumentar la expresión de BRIP1 o alterar su localización subcelular; considere el pretratamiento de las células para mejorar la detección.

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