Anticuerpo policlonal anti-BTK para WB, IHC-P, ELISA - Q06187

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de BTK

• BTK (tirosina quinasa de Bruton) es una tirosina quinasa no receptora esencial para el desarrollo, la diferenciación y la señalización de los linfocitos B. Fosforila PLCG2 en cooperación con BLNK después de la activación del receptor de antígeno de las células B (BCR), iniciando la movilización de calcio y la activación de la proteína quinasa C posteriores. Referencias relacionadas: PMID:11606584
• Actúa como plataforma de señalización que conecta diversas vías; participa en la señalización de los receptores de citocinas y en las vías de los receptores tipo Toll (TLR), desempeñando un papel fundamental en la inmunidad innata y adaptativa. Referencias relacionadas: PMID:16517732 PMID:17932028
• En la vía de los TLR, BTK regula la activación de TLR9 en las células B esplénicas y media la fosforilación de tirosina de TIRAP, lo que conduce a su degradación. Referencias relacionadas: PMID:16415872 PMID:16517732 PMID:17932028
• Induce la actividad de NF-kappa-B mediante la señalización de TLR8/9, regulando la transcripción de cientos de genes; también fosforila transitoriamente el factor de transcripción GTF2I, promoviendo su translocación nuclear y la modulación de la expresión génica. Referencias relacionadas: PMID:19290921 PMID:9012831
• Contribuye a la regulación de la transcripción mediante ARID3A y NFAT; es necesario para la formación de complejos funcionales de unión al ADN de ARID3A, aunque no se ha demostrado una unión directa al ADN. Referencias relacionadas: PMID:16738337
• Desempeña un papel dual en la regulación de la apoptosis y participa en la respuesta de interferón tipo I mediada por STING1 mediante la fosforilación de DDX41. Referencias relacionadas: PMID:9751072 PMID:25704810
• Su localización subcelular incluye el citoplasma, la membrana celular, el núcleo y las balsas de membrana, lo que refleja sus funciones dinámicas en la señalización. Se expresa predominantemente en los linfocitos B.
• Entre las características de la proteína se incluyen los dominios SH2, SH3 y PH, un motivo de dedos de zinc y un dominio quinasa; las modificaciones postraduccionales, como la fosforilación y la acetilación, regulan su actividad.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los dominios PH y TH N-terminales (aa 30-240), que median la orientación hacia la membrana y las interacciones proteína-proteína. Esto puede permitir el reconocimiento tanto de las formas fosforiladas como de las no fosforiladas de BTK.
• Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 76 kDa; valide la expresión utilizando líneas celulares de linfocitos B (por ejemplo, Ramos y Raji) y controles de carga adecuados.
• En IHC-P, considere la recuperación de epítopos inducida por calor y confirme el patrón de tinción en tejidos ricos en células B, como el bazo o los ganglios linfáticos; se recomiendan controles de isotipo.
• Para ELISA, titule el anticuerpo para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento y detección; la reactividad cruzada con la BTK de ratón y de rata puede facilitar los estudios multiespecie.
• Tenga en cuenta que BTK se expresa a niveles bajos en las células no B; se recomienda incluir controles adecuados de las muestras para evitar falsos negativos.

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