Anticuerpo monoclonal de conejo anti-C3 para WB, IF/ICC, ELISA - P01024

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de C3

• El complemento C3 es el componente central de las vías clásica, alternativa, de las lectinas y del complemento GZMK. Es el precursor de la opsonina C3b, que se une covalentemente a las superficies de los patógenos, marcándolos para la fagocitosis, y forma el complejo convertasa de C5 que activa el complemento C5. Referencias relacionadas: PMID:28264884, PMID:31507604, PMID:3653927, PMID:6903192, PMID:12878586, PMID:18204047, PMID:2387864, PMID:624565, PMID:6554279
• La anafilotoxina C3a, generada por la escisión de la convertasa de C3, se une al receptor C3AR1, induciendo la desgranulación de mastocitos y basófilos, la quimiotaxis de macrófagos y neutrófilos, y la liberación de citocinas proinflamatorias. Referencias relacionadas: PMID:6968751, PMID:37169960, PMID:37852260, PMID:8702752, PMID:23383423, PMID:342601, PMID:5778786
• C3 actúa como una hormona adipogénica, estimulando la síntesis de triglicéridos y el transporte de glucosa en los adipocitos a través del receptor C5AR2 y de las vías de señalización posteriores PLC, MAPK y AKT. Referencias relacionadas: PMID:10432298, PMID:15833747, PMID:16333141, PMID:11773063, PMID:12540846, PMID:19615750
• Actúa como quimioatrayente para los neutrófilos en la inflamación crónica.
• C3 se secreta y también se encuentra en la superficie celular; su enlace tioéster reactivo permite la unión covalente a las superficies diana.
• El plasma es el sitio primario de C3, pero esta proteína también es producida y liberada por los adipocitos durante los períodos de ayuno y posprandiales.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, formación de enlaces disulfuro, formación de enlaces tioéster y fosforilación, procesos fundamentales para su estabilidad y función.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al fragmento C3c (aminoácidos 1364-1663); el anticuerpo puede reconocer C3 de longitud completa y productos de escisión que contengan esta región, como C3b y C3c.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 187 kDa en condiciones reductoras; pueden aparecer bandas adicionales de menor peso molecular debido al procesamiento fisiológico de C3.
• Para inmunofluorescencia/ICC, deben optimizarse los protocolos adecuados de fijación y permeabilización; se recomienda considerar el uso de un control positivo, como células tratadas con suero o cortes de tejido, para evaluar la tinción específica.
• En aplicaciones de ELISA, la combinación con otros anticuerpos contra C3 o marcadores del complemento puede mejorar la sensibilidad; incluya controles negativos adecuados para confirmar la especificidad.
• Valide el anticuerpo en sistemas de muestras relevantes, como humano, ratón y rata, y considere su rendimiento en ensayos de activación del complemento.

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