Anticuerpo policlonal anti-Calpaína 1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P07384

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la calpaína-1

• La calpaína-1, codificada por el gen CAPN1, también se conoce como proteinasa neutra 1 activada por calcio (CANP 1), mu-calpaína o muCANP, y actúa como la subunidad catalítica de la proteasa calpaína micromolar.
• Funciona como una tiol-proteasa no lisosomal regulada por calcio, mediando la proteólisis limitada de sustratos implicados en la remodelación del citoesqueleto y la transducción de señales. Referencias relacionadas: PMID:19617626, PMID:21531719, PMID:2400579
• La calpaína-1 escinde específicamente CTBP1 en la asparagina-375, la glicina-387 y la histidina-409, y también escinde y activa la caspasa-7 (CASP7). Referencias relacionadas: PMID:23707407, PMID:19617626
• A nivel subcelular, la calpaína-1 se localiza en el citoplasma y la membrana celular.
• Se expresa de forma ubicua en los tejidos humanos.
• Entre sus características principales se incluyen la escisión autocatalítica, los dominios EF-hand de unión al calcio y la susceptibilidad a la acetilación y la fosforilación; las mutaciones del gen CAPN1 asociadas a enfermedades están relacionadas con la paraplejia espástica hereditaria.

Orientación experimental y consejos técnicos

• En Western blot, se espera una banda de aproximadamente 82 kDa; considere utilizar controles positivos y negativos adecuados y validar el resultado en su sistema de muestras.
• Para IHC-P, los métodos de recuperación antigénica, como la recuperación de epítopos inducida por calor, pueden mejorar la detección; optimice las condiciones de tinción para su tipo específico de tejido y la dilución del anticuerpo.
• Para IF/ICC, se requiere permeabilización para detectar la calpaína-1 intracelular; las condiciones de fijación deben optimizarse cuidadosamente.
• Se prevé que el anticuerpo reconozca la calpaína-1 humana, de ratón y de rata basándose en la homología de secuencia; la reactividad cruzada debe validarse experimentalmente en el sistema modelo correspondiente.
• El rendimiento del ELISA puede optimizarse mediante una titulación en tablero de ajedrez del anticuerpo y el antígeno; utilice pasos adecuados de bloqueo y lavado.

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