Anticuerpo monoclonal anti-Calreticulina [Validado por KO] para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27797

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Calreticulina

• La Calreticulina (CALR) es una proteína de unión a calcio de 417 aminoácidos, también conocida como CRP55, Calregulina, ERp60, HACBP y grp60, codificada por el gen CALR en humanos.
• Funciona como una chaperona lectina en el retículo endoplásmico (RE), interactuando transitoriamente con glicoproteínas monoglucosiladas para promover el plegamiento, el ensamblaje oligomérico y el control de calidad a través del ciclo calreticulina/calnexina (PubMed:7876246). Referencias relacionadas: PMID:7876246
• La Calreticulina también media la exportación nuclear de NR3C1 (receptor de glucocorticoides) al unirse a su dominio de unión al ADN, influyendo en la regulación transcripcional (PubMed:11149926). Referencias relacionadas: PMID:11149926
• Se localiza principalmente en el lumen del RE, pero también se puede encontrar en el citosol, secretada al espacio extracelular, asociada a la superficie celular y dentro de vesículas citoplasmáticas como gránulos secretores y lisosomas.
• La Calreticulina juega un papel en la homeostasis del calcio y está involucrada en la regulación de la expresión génica materna; puede participar en la maduración del ovocito y en el bloqueo a la polispermia tras la exocitosis de los gránulos corticales (Por similitud).
• La proteína contiene una secuencia señal, tres repeticiones de la familia de la calreticulina y sufre modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación, hidroxilación, glicosilación y formación de enlaces disulfuro, con propiedades de unión a zinc y calcio.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 18-203, que abarcan el dominio N-terminal y parte del dominio P, conocidos por ser altamente conservados. Este diseño probablemente produce un anticuerpo que reconoce formas nativas y desnaturalizadas, adecuado para múltiples aplicaciones.
• Para Western blotting (WB), se espera una banda primaria de aproximadamente 47kDa; considere usar condiciones reductoras y validar en el lisado celular o de tejido relevante. Titre las diluciones del anticuerpo para lograr una relación señal-ruido óptima.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), los pasos de fijación y permeabilización pueden influir en la tinción de la calreticulina localizada en el RE; la recuperación antigénica con buffer de citrato (pH 6.0) y el bloqueo con suero se usan comúnmente.
• Para ELISA, este anticuerpo monoclonal puede servir como reactivo de captura o detección; se recomienda emparejarlo con un anticuerpo o calibrador compatible para ensayos cuantitativos.
• El estado de validación por KO indica que el anticuerpo reconoce específicamente la calreticulina, ya que la señal se abole en modelos de knockout; incluya siempre controles apropiados en las configuraciones experimentales.

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