Anticuerpo Policlonal Anti-CARD8 para WB y ELISA - Q9Y2G2

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CARD8

• CARD8 (proteína 8 que contiene el dominio de reclutamiento de caspasas), también conocida como CARDINAL, TUCAN, NDPP1, DAKAR, DACAR o NDPP, es un miembro de la familia de proteínas que contienen dominios CARD.
• CARD8 actúa como un sensor del inflamasoma, que reconoce señales de patógenos/daño como la actividad de la proteasa del VIH-1 o el inhibidor Val-boroPro, y media la activación del inflamasoma que conduce a la piroptosis de linfocitos T CD4+ y macrófagos.
  Referencias relacionadas: PMID:11408476, PMID:11821383, PMID:15030775, PMID:32840892, PMID:33542150, PMID:36357533
• La proteína de longitud completa sufre procesamiento autoproteolítico dentro del dominio FIIND, generando fragmentos N-terminal y C-terminal que permanecen asociados de forma no covalente en ausencia de estímulos.
• Tras la detección del patógeno, el fragmento N-terminal es ubiquitinado y degradado por el proteasoma, liberando el fragmento C-terminal para formar el inflamasoma de CARD8, que recluta directamente a la procaspasa-1 y promueve su activación, lo que resulta en la escisión de GSDMD y la piroptosis.
  Referencias relacionadas: PMID:32558991, PMID:32051255, PMID:32840892, PMID:33053349, PMID:34019797
• Además de su papel en el inflamasoma, CARD8 también funciona como regulador negativo de la activación de NF-kappa-B y del inflamasoma NLRP3.
  Referencias relacionadas: PMID:11551959, PMID:12067710, PMID:24517500
• CARD8 se localiza en el citoplasma, el núcleo y los complejos de inflamasoma ensamblados.
• CARD8 se expresa altamente en pulmón, ovario, testículo y placenta, con menor expresión en corazón, riñón e hígado; también se expresa en bazo, ganglio linfático y médula ósea.
  Referencias relacionadas: PMID:11551959, PMID:11821383
• CARD8 participa en la defensa del huésped contra el VIH-1: detecta la actividad de la proteasa del VIH-1, lo que conduce a la eliminación del virus latente después de la reactivación viral, mientras que el VIH-1 puede evadir la detección manteniendo la inactividad de la proteasa en las células infectadas.
  Referencias relacionadas: PMID:33542150

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal de los aminoácidos 1-200, por lo que el anticuerpo probablemente reconoce la CARD8 de longitud completa y su fragmento N-terminal. Se recomienda verificar la especificidad analizando los productos del procesamiento autoproteolítico en lisados celulares.
• Para western blot, utilice líneas celulares o tejidos humanos con expresión confirmada de CARD8 (por ejemplo, macrófagos THP-1, lisados de pulmón u ovario). La proteína de longitud completa predicha tiene ~61 kDa, pero también se pueden detectar fragmentos de escisión. Incluya controles positivos y negativos adecuados.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede emplear en formatos sándwich o indirectos. Empárelo con un anticuerpo detector dirigido a un epitopo distinto de CARD8 para garantizar la especificidad del ensayo.
• Dado que este anticuerpo policlonal está validado para CARD8 humana, la reactividad cruzada con otras especies debe probarse experimentalmente. Considere el uso de activadores del inflamasoma (por ejemplo, Val-boroPro) o inhibidores de la proteasa del VIH-1 en modelos de infección relevantes para estudiar la dinámica de CARD8.

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