Anticuerpo monoclonal anti-Caspasa-1 para WB, ELISA - P29466

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la Caspasa-1

• La Caspasa-1, también conocida como convertasa de la interleucina-1 beta (ICE/p45/IL1BC), es un miembro de la familia de las caspasas, proteasas de cisteína-ácido aspártico (proteasas tiol), que desempeña un papel central en las respuestas inflamatorias y la muerte celular programada.
• Es esencial para el procesamiento y la secreción de las citocinas proinflamatorias interleucina-1 beta (IL-1β) e interleucina-18 (IL-18), mediante la escisión de sus formas precursoras en péptidos maduros biológicamente activos.
  Referencias relacionadas: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• La Caspasa-1 inicia la piroptosis, una forma lítica de muerte celular programada, mediante la escisión de la gasdermina-D (GSDMD), y el reconocimiento del sustrato implica una interfaz exosítica distinta del sitio de escisión canónico.
  Referencias relacionadas: PMID:26375003, PMID:32051255, PMID:32109412, PMID:32553275
• Además de IL-1β/IL-18 y GSDMD, la Caspasa-1 también escinde otros sustratos, incluida la caspasa-7 (CASP7) durante la infección bacteriana para promover la reparación de la membrana, la sintasa de GMP-AMP cíclico (CGAS) para regular la inmunidad antiviral y la esfingosina cinasa 2 (SPHK2) en células apoptóticas.
  Referencias relacionadas: PMID:22464733, PMID:28314590, PMID:20197547
• Se localiza principalmente en el citoplasma, pero también puede asociarse con la membrana celular.
• La expresión tisular es más elevada en el bazo y el pulmón, con niveles inferiores detectados en el hígado, el corazón, el intestino delgado, el colon, el timo, la próstata, el músculo esquelético, los leucocitos de sangre periférica, el riñón y los testículos; no se expresa en el cerebro.
• El corte y empalme alternativo genera isoformas inactivas en la apoptosis, y la proteína está sujeta a modificaciones postraduccionales, incluida la fosforilación, la conjugación similar a la ubiquitina y el procesamiento de zimógeno a enzima activa.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 120–297 de la Caspasa-1 humana (NP_150634.1), que se encuentra dentro de la subunidad p20 de la enzima procesada; esta región puede producir anticuerpos que reconozcan tanto la proforma como los fragmentos escindidos, pero los usuarios deben validarlos en su matriz de muestra específica.
• Para Western blot, la proenzima de longitud completa de la Caspasa-1 migra aproximadamente a 45 kDa; pueden aparecer bandas adicionales correspondientes a las subunidades p20 y p10 procesadas, dependiendo del estado de activación. Por ello, deben optimizarse las condiciones de carga y detección.
• En aplicaciones de ELISA, considere utilizar el inmunógeno recombinante como estándar de referencia o antígeno de recubrimiento, y verifique la reactividad cruzada con miembros relacionados de la familia de las caspasas si la especificidad es crítica.
• La reactividad cruzada se ha confirmado para humanos; para experimentos con otras especies, realice una validación independiente, ya que la homología de secuencia varía.

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