Anticuerpo policlonal de conejo anti-Caspasa-1 para WB, IF/ICC, ELISA - P29466

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Caspasa-1

• La Caspasa-1 es una tiol proteasa que escinde los precursores de la interleucina-1 beta (IL1B) y la interleucina 18 (IL18) para convertirlos en sus formas activas maduras, cumpliendo un papel central en las respuestas inflamatorias. Referencias relacionadas: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• También inicia la piroptosis, una vía de muerte celular programada lítica, al escindir la Gasdermina-D (GSDMD), liberando su dominio N-terminal para formar poros en la membrana. Referencias relacionadas: PMID:26375003
• La activación de la Caspasa-1 se produce dentro de los complejos del inflamasoma, que se ensamblan en respuesta a señales asociadas a patógenos o daño, lo que conduce a la escisión autocatalítica inducida por proximidad de la proenzima.
• El empalme alternativo produce múltiples isoformas, incluidas formas que carecen de actividad proteasa, aunque sus funciones fisiológicas aún no se han caracterizado completamente.
• A nivel subcelular, la Caspasa-1 se encuentra predominantemente en el citoplasma, pero una fracción se asocia a la membrana celular, lo que puede facilitar su función en el procesamiento de sustratos proximales a la membrana.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación y ubiquitinación; la enzima se sintetiza inicialmente como un zimógeno inactivo que requiere escisión proteolítica para su activación.
• La expresión tisular es mayor en bazo y pulmón, y se detecta en hígado, corazón, intestino delgado, colon, timo, próstata, músculo esquelético, leucocitos de sangre periférica, riñón y testículo, pero no en cerebro.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a una región central (aa 201-300) de la Caspasa-1 humana. Para Western blotting, el peso molecular esperado de la forma profórmica es de aproximadamente 45 kDa; tras la activación, se pueden observar productos de escisión de tamaños menores. Se recomienda utilizar lisados celulares tratados con activadores del inflamasoma (por ejemplo, LPS/ATP) para monitorear la escisión.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, se requiere permeabilización para detectar la Caspasa-1 localizada en el citoplasma y la membrana. Incluya controles apropiados y valide el patrón de tinción en el contexto celular relevante.
• Se predice que este anticuerpo tiene reactividad cruzada con ratón y rata debido a la homología de secuencia en la región del inmunógeno; sin embargo, verifique la reactividad en su sistema experimental específico mediante pruebas preliminares.

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