Anticuerpo monoclonal anti-Caspasa-3 para WB, ELISA - P42574

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Caspasa-3

• La Caspasa-3 (EC 3.4.22.56), también conocida como apopaina, CPP32, Yama y SCA-1, es una caspasasa ejecutora principal en la vía apoptótica. Referencias relacionadas: PMID:18723680, PMID:20566630, PMID:23650375
• La enzima se sintetiza como un cimógeno inactivo (pro-caspasa-3) que sufre procesamiento proteolítico por caspasas iniciadoras (CASP8, CASP9, CASP10) para generar las subunidades activas p17 y p12. Referencias relacionadas: PMID:7596430, PMID:18723680
• Tras la activación, la Caspasa-3 escinde numerosos sustratos celulares, incluidos PARP1, SREBPs y caspasas-6/-7/-9, para ejecutar la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:10497198, PMID:16374543, PMID:7596430
• Más allá de la apoptosis, la Caspasa-3 también media la piroptosis al escindir la gasdermina-E (GSDME) e inhibe la producción de interferón tipo I durante la infección viral al dirigirse a CGAS, IRF3 y MAVS. Referencias relacionadas: PMID:35338844, PMID:35446120, PMID:30878284
• La proteína se localiza principalmente en el citoplasma y se expresa abundantemente en pulmón, bazo, corazón, hígado, riñón y células inmunitarias.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación, S-nitrosilación y ubiquitinación, que regulan su actividad y estabilidad.
• La Caspasa-3 también desempeña funciones en la poda axonal, la adhesión celular a través de la escisión de RET y DSG2, y la exposición de fosfatidilserina mediante la escisión de scramblasa. Referencias relacionadas: PMID:21357690, PMID:17559062, PMID:23845944, PMID:33725486

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 29–175, que cubren la subunidad grande p17 de la Caspasa-3. En Western blot, el anticuerpo puede reconocer tanto la pro-caspasa-3 (aprox. 32 kDa) como la subunidad grande activa escindida (aprox. 17–20 kDa); se recomiendan controles apropiados de inducción de apoptosis (por ejemplo, tratamiento con estaurosporina) para verificar la detección de las formas procesadas.
• La validación por KO garantiza una alta especificidad para el objetivo; considere incorporar líneas celulares o tejidos con knockout como controles negativos en sus experimentos.
• Para ELISA, valide el par de anticuerpos en las condiciones de ensayo previstas y confirme la sensibilidad con proteína recombinante de Caspasa-3.
• La reactividad cruzada con ratón permite estudios comparativos entre modelos de apoptosis humanos y de ratón.

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