Anticuerpo policlonal de conejo anti-Caspasa-3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42574

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la Caspasa-3

• La Caspasa-3 (CPP32, SCA-1) es una proteasa tiol y la principal caspasa ejecutora de la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:18723680, PMID:20566630, PMID:23650375
• Una vez activada por las caspasas iniciadoras (CASP8, CASP9, CASP10), escinde sustratos clave como PARP1 (PubMed:10497198, PubMed:16374543, PubMed:7596430), lo que provoca la inhibición de la reparación del ADN y la muerte celular apoptótica. Referencias relacionadas: PMID:10497198, PMID:16374543, PMID:7596430
• También escinde y activa las caspasas ejecutoras posteriores (CASP6, CASP7) y amplifica la cascada de caspasas (PubMed:7596430). Referencias relacionadas: PMID:7596430
• Además de participar en la apoptosis, la Caspasa-3 interviene en la piroptosis mediante la escisión de la gasdermina-E (GSDME) (PubMed:35338844, PubMed:35446120) y regula la inflamación mediante la inactivación de la interleucina-18 (PubMed:37993714, PubMed:9334240). Referencias relacionadas: PMID:35338844, PMID:35446120, PMID:37993714, PMID:9334240
• Media la exposición de fosfatidilserina en las células apoptóticas mediante la escisión de las escramblasas XKR (PubMed:23845944, PubMed:33725486) y contribuye a los cambios en la adhesión celular mediante la escisión de proteínas desmosómicas (PubMed:17559062). Referencias relacionadas: PMID:23845944, PMID:33725486, PMID:17559062
• A nivel subcelular, la Caspasa-3 se encuentra predominantemente en el citoplasma, en consonancia con su función ejecutora.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación, S-nitrosilación y ubiquitinación, y se sintetiza como un zimógeno inactivo que requiere escisión para activarse.
• Se expresa en altos niveles en pulmón, bazo, corazón, hígado, riñón y células inmunitarias, y presenta baja expresión en los testículos, lo que refleja su función clave en la homeostasis tisular y la función inmunitaria.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 6-105) de la Caspasa-3 humana de longitud completa (32 kDa). En WB, es posible detectar tanto la proforma (~32 kDa) como el fragmento grande escindido (~17 kDa), dependiendo de la inducción de la apoptosis.
• Para IHC-P, considere optimizar las condiciones de recuperación antigénica (por ejemplo, tampón de citrato a pH 6,0) según lo recomendado para su tipo de tejido y protocolo de fijación.
• Se ha informado que este anticuerpo policlonal presenta reactividad cruzada con la Caspasa-3 de ratón y rata debido a la homología de secuencia; sin embargo, recomendamos validar la especificidad en su propio sistema experimental.
• Para ELISA, utilice un formato sándwich estándar y confirme la combinación óptima de anticuerpos y la sensibilidad de detección con Caspasa-3 recombinante como referencia.

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