Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Caspasa-8 para WB, IP, IF/ICC, ELISA - O89110

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Caspasa-8

• La Caspasa-8 es una proteasa tiol que actúa como un interruptor molecular para la muerte celular programada, integrando señales para apoptosis, necroptosis y piroptosis para prevenir daño tisular durante el desarrollo y la edad adulta. Referencias relacionadas: PMID:12065591 PMID:18455983 PMID:30361383
• Actúa como la caspasa iniciadora en la vía de apoptosis extrínseca, reclutada a los receptores de muerte (FAS/CD95, TNFRSF1A) a través de FADD para formar el complejo de señalización inductor de muerte (DISC), donde se activa proteolíticamente y posteriormente escinde las caspasas efectoras aguas abajo (CASP3, CASP6, CASP7) y BID para desencadenar la liberación de citocromo C mitocondrial. Referencias relacionadas: PMID:24813849 PMID:24813850 PMID:9654089 PMID:9727491 PMID:9727492
• La Caspasa-8 regula negativamente la necroptosis al escindir RIPK1 en Asp-325, un evento crítico que previene la auto-fosforilación de RIPK1 y limita la muerte celular y la inflamación inducidas por TNF. Referencias relacionadas: PMID:31511692
• Bajo condiciones específicas (p. ej., inhibición de TAK1), la Caspasa-8 puede iniciar la piroptosis al escindir y activar la gasdermina-C (GSDMC) y la gasdermina-D (GSDMD), conduciendo a la formación de poros y muerte celular lítica. Referencias relacionadas: PMID:30361383 PMID:30381458
• También funciona en la inmunidad innata al escindir e inactivar el regulador negativo N4BP1 aguas abajo de TLR3 y TLR4, promoviendo así la producción de citocinas. Referencias relacionadas: PMID:32971525
• La Caspasa-8 es predominantemente citoplasmática pero también puede localizarse en el núcleo. Se expresa ampliamente, con los niveles más altos en bazo, timo, pulmón, hígado y riñón, y niveles más bajos en corazón, cerebro, testículo y músculo esquelético.
• La proteína está sujeta a acetilación y fosforilación, y se sintetiza como un zimógeno inactivo que requiere dimerización y escisión para alcanzar su actividad completa. Pertenece a la familia de peptidasas C14A de proteasas dependientes de cisteína dirigidas por aspartato.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los residuos 1-218 de la Caspasa-8 de ratón, incluyendo el dominio pro-N-terminal. Considere esta región al diseñar estrategias de detección, ya que los anticuerpos pueden reconocer tanto las formas de longitud completa como las parcialmente procesadas.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 55 kDa, pero pueden aparecer fragmentos de escisión más pequeños tras la inducción de la apoptosis. Valide la especificidad utilizando controles positivos y negativos apropiados en su sistema celular.
• La inmunoprecipitación y la inmunofluorescencia/ICC son compatibles con este anticuerpo monoclonal de conejo. Optimice los pasos de fijación y permeabilización para dianas intracelulares e incluya controles de isotipo.
• En ELISA, utilice este anticuerpo como reactivo de captura o detección en formatos sándwich. Confirme el rendimiento con estándares de proteína recombinante para establecer linealidad y sensibilidad.

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