Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Caspasa-8 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14790

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Caspasa-8

• CASP8 codifica una proteasa de tiol que sirve como un interruptor molecular para la apoptosis, necroptosis y piroptosis, y es esencial para prevenir el daño tisular durante el desarrollo embrionario y la edad adulta. Referencias relacionadas: PMID:23516580, PMID:35338844, PMID:35446120
• En la apoptosis extrínseca, CASP8 es reclutada a los receptores de muerte (FAS/TNFRSF1A) a través del adaptador FADD, formando el complejo de señalización inductor de muerte (DISC) donde sufre activación proteolítica. Referencias relacionadas: PMID:8681376, PMID:8681377, PMID:9184224
• La CASP8 activada escinde y activa las caspasas efectoras descendientes (CASP3, CASP4, CASP6, CASP7, CASP9, CASP10) así como BID, vinculando la señalización del receptor de muerte con la vía mitocondrial de apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:16916640, PMID:8962078, PMID:9006941
• CASP8 también actúa como un regulador negativo de la necroptosis al escindir RIPK1 en Asp-324, limitando la necroptosis inducida por TNF y la inflamación. Referencias relacionadas: PMID:31827280, PMID:31827281
• En la piroptosis, CASP8 escinde gasdermina-C y -D (GSDMC, GSDMD), generando fragmentos N-terminales formadores de poros que desencadenan la permeabilización de la membrana. Referencias relacionadas: PMID:32929201, PMID:34012073
• A nivel subcelular, CASP8 se localiza en el citoplasma, el núcleo y las proyecciones celulares como las lamelipodios.
• Las isoformas 1, 5 y 7 se expresan ampliamente, con los niveles más altos en leucocitos de sangre periférica, bazo, timo e hígado; las isoformas con empalme alternativo que carecen de actividad catalítica pueden actuar como inhibidores dominantes negativos de la cascada de caspasas. Referencias relacionadas: PMID:12010809

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aa 376–479) de la Caspasa-8 humana; tanto la forma de longitud completa como los fragmentos escindidos pueden detectarse en Western blot—valide los patrones de bandas en su sistema experimental.
• Para Western blot, espere una banda cercana a 55 kDa para la proenzima; pueden aparecer bandas adicionales que representan fragmentos escindidos activos tras la inducción de apoptosis.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), considere la recuperación de antígeno con tampón de citrato o Tris-EDTA y optimice las condiciones de bloqueo para su tejido.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), ajuste la fijación y la permeabilización para equilibrar la accesibilidad del antígeno y la preservación morfológica.
• Se predice que el anticuerpo presenta reactividad cruzada con ratón y rata según los datos del fabricante; realice una alineación de secuencias para confirmar la conservación del epítopo si trabaja con otras especies.

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