Anticuerpo Policlonal contra Caspasa-9 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55211

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Contexto Biológico: Función y Localización de la Caspasa-9

• La Caspasa-9, también conocida como proteasa apoptótica Mch-6 (MCH6), APAF-3 o ICE-LAP6, es miembro de la familia de las proteasas cisteín-aspárticas (caspasas) y está codificada por el gen CASP9 en humanos.
• Actúa como caspasa iniciadora en la vía intrínseca de la apoptosis. Tras la liberación de citocromo c y la formación del apoptosoma de Apaf-1, la caspasa-9 se recluta y activa, para posteriormente escindir y activar las caspasas efectoras 3 y 7. También escinde la poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP) y promueve la apoptosis inducida por daño en el ADN de forma dependiente de ABL1. Además, la caspasa-9 escinde proteolíticamente a BIRC6 después de la inhibición mediada por DIABLO/SMAC del complejo BIRC6-caspasa. Referencias relacionadas: PMID:36758105 PMID:36758106
• El empalme alternativo de CASP9 produce una isoforma catalíticamente inactiva que actúa como inhibidor dominante negativo de la señalización de la caspasa-9.
• La Caspasa-9 se expresa de forma ubicua, con niveles más altos en el corazón, donde se encuentra específicamente en los miocitos. Se observa expresión moderada en hígado, músculo esquelético y páncreas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación y conjugación de tipo ubiquitina, según indican los datos proteómicos, que regulan su actividad, estabilidad e interacción con otras proteínas.
• La proteína se sintetiza como un zimógeno inactivo que requiere procesamiento proteolítico para su activación. Como proteasa tiol, utiliza un residuo de cisteína catalítica para la hidrólisis, y se clasifica dentro de las hidrolasas relacionadas con la apoptosis.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado para este anticuerpo corresponde a los aminoácidos 139–416 de la caspasa-9 humana (NP_001220.2). Esta región cubre parte del dominio catalítico grande, por lo que puede reconocer tanto la forma completa como la forma escindida. Para Western blot, se puede detectar una banda de aproximadamente 46 kDa para la forma profórmula, con bandas adicionales correspondientes a los fragmentos escindidos dependiendo del tratamiento de la muestra.
• Este anticuerpo está recomendado para Western blot (WB), inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), inmunohistoquímica (IHC-P) y ELISA. Los investigadores deben optimizar las diluciones e incluir controles positivos y negativos apropiados, especialmente al trabajar con muestras de humano, ratón y rata.
• Dado que la caspasa-9 es principalmente una proteína citoplásmica que se transloca a las mitocondrias durante la apoptosis, la localización subcelular puede variar, por lo que las condiciones de fijación/permeabilización para IF/ICC o IHC-P deben adaptarse en consecuencia.

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