Anticuerpo Policlonal Anti-CASR para WB, IHC-P, ELISA - P41180

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del CASR

• El receptor sensor de calcio extracelular (CASR), también conocido como receptor sensor de calcio 1 de las células paratiroideas (PCaR1), está codificado por el gen CASR (nombres alternativos: GPRC2A, PCAR1) y pertenece a la familia de los receptores acoplados a proteínas G. El empalme alternativo da lugar a múltiples isoformas.
• El CASR actúa como un regulador clave de la homeostasis sistémica del calcio al detectar las fluctuaciones en la concentración de calcio extracelular. En las glándulas paratiroideas, el aumento del calcio circulante activa el CASR, lo que conduce a una disminución de la secreción de hormona paratiroidea (PTH). En el riñón, modula la reabsorción tubular renal de calcio. Referencias relacionadas: PMID:17555508 PMID:19789209 PMID:21566075
• Tras la unión del ligando, el CASR sufre cambios conformacionales que desencadenan la señalización a través de múltiples subtipos de proteínas G. Puede acoplarse a G(q)/G(11) para activar la fosfolipasa C-beta (generando DAG e IP3) y a G(i)/G(o) para inhibir la adenilato ciclasa, dependiendo la vía específica del contexto celular. Referencias relacionadas: PMID:38632411 PMID:7759551
• La activación completa del receptor sigue un mecanismo de co-agonista en el que los aminoácidos aromáticos (p. ej., Trp, Phe) actúan de manera concertada con cationes divalentes como el calcio o el magnesio. Referencias relacionadas: PMID:27386547 PMID:27434672 PMID:32817431
• Más allá de la detección del calcio, se ha demostrado que el CASR activa el inflamasoma NLRP3 a través de la regulación negativa mediada por G(i)/G(o) del AMPc, lo que alivia la inhibición de NLRP3. Referencias relacionadas: PMID:32843625
• El receptor se localiza predominantemente en la membrana celular, lo que es coherente con su función de detectar señales extracelulares.
• La expresión tisular es amplia, con detección en el lóbulo temporal, lóbulo frontal, lóbulo parietal, hipocampo, cerebelo, riñón, pulmón, hígado, corazón, músculo esquelético y placenta.
• Las modificaciones post-traduccionales clave y las características estructurales incluyen enlaces disulfuro, glicosilación, fosforilación y conjugación de ubiquitina, que pueden influir en el tráfico y la función del receptor. Contiene un péptido señal y siete hélices transmembrana características de los GPCR.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 180–536 del CASR humano, una región dentro del gran dominio extracelular que es crítica para la unión del ligando. Este diseño probablemente genera anticuerpos que reconocen el receptor nativo.
• Para la transferencia Western (Western blotting, WB), el peso molecular predicho del CASR es de aproximadamente 121 kDa. Sin embargo, la glicosilación extensa y otras modificaciones pueden dar como resultado un peso molecular aparente mayor. Valide la banda de interés utilizando los controles adecuados y considere experimentos de desglicosilación si es necesario.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), pueden ser necesarios métodos de recuperación de antígenos para desenmascarar epítopos en tejidos fijados en formol e incluidos en parafina. Optimice las condiciones de tinción con tejidos de control positivos y negativos.
• Se espera que el anticuerpo presente reactividad cruzada con el CASR de humano, ratón y rata. Al trabajar con modelos animales, confirme la reactividad en la especie relevante mediante el análisis de una muestra de control.
• Para aplicaciones de ELISA, la naturaleza policlonal de este anticuerpo puede proporcionar una alta sensibilidad. Puede utilizarse como anticuerpo de captura o de detección, pero el rendimiento debe verificarse con estándares de proteínas recombinantes o nativas.

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