Anticuerpo Policlonal Anti-Catepsina K (CTSK) para WB y ELISA - P43235

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Catepsina K

• La Catepsina K (CTSK), también conocida como catepsina O, O2 o X, es una cisteína proteasa lisosomal de la familia de la papaína, sintetizada como un zimógeno inactivo que sufre activación proteolítica.
• Desempeña un papel crítico en la resorción ósea osteoclástica al degradar proteínas de la matriz ósea, incluido el colágeno tipo I, y es esencial para la remodelación ósea normal.
• CTSK exhibe una potente actividad endoproteasa contra el fibrinógeno a pH ácido, lo que sugiere un papel en la degradación de la matriz extracelular más allá del hueso.
• En la tiroides, la CTSK está involucrada en la liberación de la hormona tiroidea tiroxina (T4) a través de la proteólisis limitada de la tiroglobulina en el lumen del folículo tiroideo (PubMed:11082042). Referencias relacionadas: PMID:11082042
• La proteína se expresa predominantemente en osteoclastos (PubMed:7805878) y células epiteliales tiroideas (PubMed:11082042). Referencias relacionadas: PMID:7805878, PMID:11082042
• Subcelularmente, la CTSK se localiza en los lisosomas, se secreta al espacio extracelular y puede asociarse con la membrana celular apical en células polarizadas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación y formación de enlaces disulfuro, importantes para la estabilidad y actividad; la enzima madura es una glicoproteína.
• Las mutaciones en CTSK se asocian con picnodisostosis, una displasia esquelética autosómica recesiva caracterizada por huesos densos (osteosclerosis).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno se generó contra un fragmento recombinante (aa 115-329) que abarca el dominio catalítico maduro, se espera que el anticuerpo reconozca tanto la forma pro como la CTSK madura activa en condiciones desnaturalizantes de Western blot (WB); sin embargo, la detección de la proteína endógena puede requerir optimización dependiendo de los niveles de expresión en el tejido.
• Para el análisis de Western blot, considere usar condiciones reductoras e incluir inhibidores de proteasa durante la preparación de la muestra para prevenir la degradación de CTSK. El peso molecular predicho de la proenzima es de ~37 kDa, pero las formas maduras escindidas pueden aparecer más pequeñas.
• La reactividad cruzada reportada con ratón sugiere utilidad para estudios traslacionales que utilizan modelos de ratón del metabolismo óseo. Valide la reactividad cruzada en su sistema experimental específico.
• Para ELISA, considere emparejar este anticuerpo con un anticuerpo de captura o conjugarlo directamente para la detección; tenga en cuenta que, al ser policlonal, se debe verificar la consistencia entre lotes.
• Las condiciones de tampón ácido pueden mejorar la interacción anticuerpo-antígeno para aplicaciones como inmunohistoquímica o ensayos de actividad enzimática, dado el pH óptimo ácido de la CTSK.

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