Anticuerpo Policlonal Anti-Catepsina L/V/K/H para WB, IF/ICC, ELISA - P07711

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Catepsina L

• La procatepsina L (Catepsina L1) es una cisteína proteasa lisosomal codificada por el gen CTSL, también conocida como proteína principal excretada (MEP). La iniciación alternativa produce isoformas con o sin péptido señal, lo que conduce a la localización nuclear o lisosomal.
• Funciona como una tiol proteasa crítica para la degradación proteica general en los lisosomas, el procesamiento de antígenos, la remodelación ósea y la liberación de hormonas tiroideas a través de la proteólisis de la tiroglobulina.
• Extracelularmente, actúa como una enzima principal que degrada la elastina a pH neutro y genera endostatina a partir de COL18A1, contribuyendo a la remodelación de la matriz extracelular durante la inflamación. Referencias relacionadas: PMID:10716919
• Facilita la entrada en la célula huésped de coronavirus (SARS-CoV, SARS-CoV-2) y del virus del Ébola al activar proteolíticamente las glicoproteínas de la espiga viral en los lisosomas a través de una ruta de activación lenta por ácido. Referencias relacionadas: PMID:16339146 PMID:18562523 PMID:32142651 PMID:16081529 PMID:26953343
• Regula la progresión del ciclo celular mediante el procesamiento proteolítico del factor de transcripción CUX1; las isoformas nucleares que carecen del péptido señal escinden CUX1 para modular la expresión génica. Referencias relacionadas: PMID:15099520
• La localización subcelular incluye lisosomas, membranas celulares apicales, vesículas secretoras (gránulos cromafines) y el espacio extracelular; además, se encuentra en el núcleo cuando se traduce a partir de sitios de inicio aguas abajo.
• Modificada postraduccionalmente por glicosilación y formación de enlaces disulfuro; se sintetiza como un zimógeno inactivo que se procesa proteolíticamente para convertirse en la enzima activa madura.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado corresponde a los aminoácidos 114-333 de la Catepsina L humana, una región dentro del dominio de la proteasa madura, lo que puede contribuir a la reactividad cruzada con los ortólogos de ratón y rata.
• Para Western blotting (WB), el peso molecular previsto de la proforma es de aproximadamente 38 kDa; sin embargo, las formas procesadas maduras pueden aparecer más pequeñas. Incluya inhibidores de proteasas apropiados durante la preparación de la muestra.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), considere las condiciones de permeabilización para detectar los grupos lisosomales o nucleares, y valide la localización con marcadores de orgánulos.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir optimizar las condiciones de recubrimiento y la dilución del anticuerpo; utilice proteína recombinante o péptidos estándar como controles positivos.
• Debido a la iniciación alternativa, pueden estar presentes múltiples isoformas; verifique los patrones de bandas en su sistema celular o tisular utilizando controles apropiados.

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