Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Catepsina L/V/K/H para WB, IHC-P, ELISA - P07711/O60911/P43235/P09668

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Catepsina L

• La procatepsina L (Catepsina L1), también conocida como proteína excretada mayor (MEP), es una proteasa cisteínica lisosómica codificada por el gen CTSL. Pertenece a la familia de las peptidasas C1 y comparte una alta homología con las catepsinas V, K y H.
• Como una proteasa de tiol, la catepsina L es esencial para el recambio general de proteínas dentro de los lisosomas. Participa en diversos procesos, incluido el procesamiento de antígenos en células epiteliales tímicas, la remodelación ósea y la liberación proteolítica de la hormona tiroidea tiroxina a partir de la tiroglobulina.
• La catepsina L degrada la elastina a pH neutro y se acumula en el espacio extracelular de las células presentadoras de antígenos, contribuyendo a la remodelación de la matriz extracelular durante la inflamación. También genera el inhibidor de la angiogénesis endostatina a partir del colágeno XVIII. Referencias relacionadas: PMID:10716919
• En células que carecen de TMPRSS2, la catepsina L facilita la entrada del SARS-CoV, SARS-CoV-2 y otros coronavirus al escindir las glucoproteínas de espiga dentro de los lisosomas, permitiendo la fusión de membranas. Referencias relacionadas: PMID:16339146
  PMID:18562523
  PMID:32142651
  PMID:16081529
  PMID:26953343
• El inicio alternativo de la traducción produce isoformas que carecen del péptido señal, las cuales se localizan en el núcleo y escinden el factor de transcripción CUX1, modulando así la progresión del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:15099520
• La catepsina L se localiza principalmente en los lisosomas, pero también se puede encontrar en la membrana celular apical, en vesículas secretoras (por ejemplo, gránulos cromafines), en el espacio extracelular y en el núcleo bajo ciertas condiciones.
• Las modificaciones post-traduccionales clave incluyen la glicosilación y la formación de enlaces disulfuro. La enzima se sintetiza como un zimógeno inactivo (procatepsina L) y se activa mediante escisión proteolítica. Su forma madura migra aproximadamente a 38 kDa en SDS-PAGE, mientras que el precursor de longitud completa ronda los 37,6 kDa.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de la región conservada (aa 50-150) de la catepsina L humana, lo que probablemente explica la reactividad cruzada con las catepsinas V, K y H. Al interpretar los resultados, considere la posible detección de múltiples miembros de la familia.
• Para la transferencia Western (Western blotting), se espera una banda cercana a 38 kDa en condiciones reductoras. Tenga en cuenta que la procatepsina L (~37,5 kDa) y sus formas procesadas también pueden ser visibles dependiendo de la preparación de la muestra y el contexto celular.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), pueden ser necesarios métodos de recuperación de antígenos para desenmascarar epítopos en tejidos fijados en formol. Se recomienda la optimización de las condiciones de recuperación (por ejemplo, tampón de citrato frente a EDTA, pH y calentamiento).
• Para ELISA, este anticuerpo puede ser adecuado como reactivo de captura o detección. Valídelo en la matriz de muestra apropiada (por ejemplo, lisados celulares, extractos de tejidos o fluidos biológicos) y confirme la especificidad con controles de proteínas recombinantes.
• Dada su expresión en una amplia gama de tejidos y tipos celulares, incluidas células inmunes y epitelios, incluya controles positivos y negativos apropiados. Para estudios relacionados con la entrada viral, tenga en cuenta que la catepsina L actúa en compartimentos ácidos; se pueden usar inhibidores como la leupeptina o E-64 para confirmar la especificidad.

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