Anticuerpo monoclonal de conejo anti-M6PR (IGF2R) independiente de cationes para WB, IHC-P, ELISA - P11717

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del M6PR (IGF2R) Independiente de Cationes

• El M6PR (IGF2R) independiente de cationes, también designado receptor de manosa 6-fosfato de 300 kDa (MPR300) o receptor del factor de crecimiento similar a la insulina 2, es una glicoproteína transmembrana grande codificada por el gen IGF2R.
• Media el transporte de enzimas lisosomales fosforiladas desde el complejo de Golgi y la superficie celular a los lisosomas. Las enzimas lisosomales que portan residuos fosfomanosilos se unen específicamente al receptor, y el complejo receptor-ligando se internaliza, disociándose en el compartimento pre-lisosomal ácido. Luego, el receptor se recicla de vuelta al Golgi a través del complejo retrómero. Referencias relacionadas: PMID:18817523, PMID:2963003
• Además de su función de tráfico dependiente de M6P, el IGF2R se une al factor de crecimiento similar a la insulina 2 (IGF2) con alta afinidad, funcionando como un receptor de aclaramiento que regula los niveles extracelulares de IGF2. Referencias relacionadas: PMID:18046459
• El IGF2R actúa como un regulador positivo de la coactivación de células T al unirse a la dipeptidil peptidasa 4 (DPP4). Referencias relacionadas: PMID:10900005
• El receptor cicla dinámicamente entre la membrana del aparato de Golgi y los compartimentos endosomales, una localización esencial para sus funciones de clasificación y transporte.
• El IGF2R está extensamente modificado postraduccionalmente, presentando glicosilación, enlaces disulfuro, acetilación, metilación, palmitoilación y fosforilación. Su estructura incluye un péptido señal, 15 repeticiones extracitoplasmáticas, una única hélice transmembrana y una cola citoplasmática corta.
• La proteína madura tiene un peso molecular predicho de aproximadamente 274 kDa, consistente con su designación como MPR300.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a una región C-terminal (aa 2140-2300), lo que puede favorecer la detección del IGF2R de longitud completa. Considere usar lisados de tejido rico en lisosomas o líneas celulares (p. ej., hígado, placenta o fibroblastos) como controles positivos para Western blot.
• Debido al gran tamaño de la proteína (274 kDa), utilice un gel de poliacrilamida de bajo porcentaje (6–8%) y condiciones de transferencia húmeda extendidas (p. ej., durante la noche a 4°C) sobre una membrana de PVDF. Incluya marcadores de alto peso molecular pre-teñidos para monitorear la eficiencia de la transferencia.
• Para IHC-P, realice una recuperación de antígeno apropiada y optimice la dilución del anticuerpo primario. Incluya controles de tejido positivo y negativo para validar la especificidad de la tinción tanto en muestras humanas como de rata.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse del uso de estándares de proteína recombinante para establecer ensayos cuantitativos. Si los diseños experimentales involucran modelos de roedores, valide la reactividad cruzada en sistemas de rata.
• Siempre valide el anticuerpo en su contexto experimental específico, ya que el rendimiento puede variar con la preparación de la muestra y las condiciones del ensayo.

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