Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CBFB para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13951

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CBFB

• Codificada por el gen CBFB, la subunidad beta del factor de unión al núcleo es una subunidad de factor de transcripción que forma un complejo heterodimérico con las proteínas de la familia RUNX (RUNX1, RUNX2, RUNX3), conocido como factor de unión al núcleo (CBF). CBFB mejora alostéricamente la afinidad de unión al ADN de los factores de transcripción RUNX.
• Los complejos CBF se unen a la secuencia consenso central 5′-TGTGGT-3′ en los potenciadores y promotores de diversos genes, incluidos el virus de la leucemia murina, el potenciador del poliomavirus, los potenciadores del receptor de células T, LCK, IL3 y GM-CSF, regulando así la transcripción.
• Durante el desarrollo de las células T citotóxicas (CD8+), los complejos CBF actúan como silenciadores transcripcionales al unirse a la secuencia de unión a RUNX dentro del locus ZBTB7B, reprimiendo su expresión para permitir la diferenciación.
• CBFB es una diana de la proteína Vif del VIH-1, que la recluta para formar un complejo de ligasa E3 de ubiquitina-proteína Cullin-5-RING (complejo ECS) que cataliza la ubiquitinación y degradación de APOBEC3F y APOBEC3G (PubMed:22190037, PubMed:31792451, PubMed:36598981). El complejo también puede ubiquitinar APOBEC3H en cierta medida (PubMed:37640699). La asociación con Vif también inhibe la actividad coactivadora de CBFB (PubMed:22190037). Referencias relacionadas: PMID:22190037 PMID:31792451 PMID:36598981 PMID:37640699
• La localización subcelular es predominantemente nuclear, en consonancia con su función en la regulación transcripcional.
• Las palabras clave de UniProt destacan su participación en el corte y empalme alternativo, los reordenamientos cromosómicos (por ejemplo, inv(16) en la leucemia mieloide aguda), el potencial protooncogénico y las asociaciones con enfermedades, incluido el enanismo. También es una fosfoproteína.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 1-182 de CBFB humano. Esta porción N-terminal contiene el dominio conservado necesario para la interacción con RUNX y es idéntica o altamente similar en ratón y rata, lo que respalda la reactividad cruzada observada.
• Para el western blot (WB), se espera una banda cercana a 22 kDa. Considere utilizar extractos nucleares y controles de carga adecuados.
• La inmunofluorescencia (IF/ICC) y la inmunohistoquímica (IHC-P) deberían revelar una localización nuclear. Valide el resultado en líneas celulares o tejidos que expresen CBFB de forma conocida.
• El ELISA puede utilizarse para el análisis cuantitativo; las condiciones óptimas de recubrimiento y las concentraciones de anticuerpo deben determinarse empíricamente.
• Al igual que con cualquier anticuerpo, valide su uso en el contexto experimental específico y considere controles de preadsorción si fuera necesario.

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