Anticuerpo policlonal de conejo anti-CD117 para WB, ELISA - P05532

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD117

• CD117, también conocido como c-Kit o receptor del factor de crecimiento de mastocitos/células madre Kit, es una receptor tirosina quinasa codificado por el protooncogén Kit (SWISS: P05532). Pertenece a la familia de receptores tirosina quinasas de tipo III, caracterizada por dominios extracelulares de tipo inmunoglobulina y un dominio quinasa intracelular.
• Al unirse a su ligando KITLG/SCF, CD117 se dimeriza y se autofosforila, activando vías de señalización descendentes como PI3K-AKT, RAS-MAPK/ERK y JAK-STAT. Estas cascadas regulan la supervivencia celular, la proliferación, la hematopoyesis, el mantenimiento de células madre, la gametogénesis, la melanogénesis y el desarrollo de mastocitos.
• Existen múltiples isoformas debidas al splicing alternativo. La isoforma 1 y la isoforma 2 se encuentran en la médula ósea y los espermatogonias; la isoforma 3 se enriquece en células madre hematopoyéticas y se detecta en etapas tardías de la espermatogénesis.
• A nivel subcelular, CD117 se localiza principalmente en la membrana celular, pero también puede ser internalizado y detectado en el citoplasma tras su activación o durante el recambio del receptor.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, formación de enlaces disulfuro, ubiquitinación y extensa fosforilación en residuos de tirosina. Estas modificaciones modulan la actividad del receptor, su estabilidad y la salida de la señalización.
• CD117 se expresa ampliamente en células madre hematopoyéticas, mastocitos, melanocitos, células germinales y células intersticiales de Cajal. Las mutaciones o la expresión aberrante se asocian a diversas patologías, entre ellas mastocitosis, tumores del estroma gastrointestinal y leucemias.
• Palabras clave asociadas a CD117: Splicing alternativo, Unión a ATP, Membrana celular, Citoplasma, Variante patológica, Enlace disulfuro, Glucoproteína, Dominio de inmunoglobulina, Quinasa, Magnesio, Membrana, Unión a metales, Unión a nucleótidos, Fosfoproteína, Protooncogén, Receptor, Proteoma de referencia, Repetición, Señal, Transferasa, Transmembrana, Hélice transmembrana, Tirosina proteína quinasa, Conjugación Ubl.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo policlonal se generó utilizando un inmunógeno recombinante que abarca los aminoácidos 25–523 de CD117 de ratón, correspondiente al dominio extracelular. Es probable que reconozca formas nativas y desnaturalizadas del receptor.
• Para Western blotting, el peso molecular predicho de CD117 es de aproximadamente 109 kDa. Debido a la glicosilación, la banda observada puede aparecer ligeramente más alta o como una banda difusa. Corra marcadores de proteína adecuados y valide la banda específica utilizando controles apropiados.
• En aplicaciones de ELISA, considere formatos indirectos o sándwich. La naturaleza policlonal puede proporcionar una alta sensibilidad, pero confirme la especificidad probándola en lisados negativos para CD117 o muestras knockout si están disponibles.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con CD117 de ratón. Para estudios en muestras humanas u otras especies, verifique la homología de secuencia y realice experimentos piloto para evaluar la reactividad cruzada.
• Como anticuerpo policlonal, la consistencia entre lotes puede variar. Es recomendable calificar cada nuevo lote en su sistema de ensayo específico y optimizar las diluciones de trabajo.

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