Anticuerpo monoclonal Anti-CD117/c-Kit para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10721

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD117/c-Kit

• El receptor del factor de crecimiento de mastocitos/células madre Kit (también conocido como SCFR, c-Kit, CD117, PBT) es una proteína quinasa de tirosina codificada por el gen KIT, un protooncogén con múltiples isoformas.
• Actúa como receptor de superficie celular para el factor de células madre (KITLG/SCF) y regula la supervivencia celular, la proliferación, la hematopoyesis, el mantenimiento de células madre, la gametogénesis, el desarrollo de mastocitos, la migración y la melanogénesis.
• Tras la unión al ligando, KIT se autofosforila y activa cascadas de señalización posteriores que incluyen las vías PI3K/AKT1, RAS/RAF/MAPK, PLCγ/PKC y JAK/STAT.
• Se localiza en la membrana celular, pero también puede encontrarse en el citoplasma, y sufre internalización y degradación inducidas por el ligando.
• En el testículo, se detecta en espermatogonias de la capa basal y en células de Leydig intersticiales, pero no en células de Sertoli ni en espermatocitos dentro de los túbulos seminíferos. La expresión se mantiene en los espermatozoides eyaculados. Referencias relacionadas: PMID:20601678
• Sus características estructurales clave incluyen dominios tipo inmunoglobulina, una hélice transmembranal, un dominio quinasa intracelular y sitios para glicosilación y formación de enlaces disulfuro.
• Está implicado en diversos cánceres y trastornos; las mutaciones se asocian a piebaldismo, tumores del estroma gastrointestinal y mastocitosis.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se produjo contra un péptido sintético que abarca los aminoácidos 871–976 de CD117/c-Kit humano. El epítopo se encuentra en la región C-terminal intracelular, que puede ser accesible en condiciones desnaturalizantes (WB) o después de una fijación/permeabilización adecuada para ICC e IHC.
• Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 110 kDa. Utilice un tampón de muestra de SDS-PAGE reductor y valide la detección con una línea celular positiva para CD117 conocida (por ejemplo, HMC-1, K562).
• En inmunofluorescencia (IF/ICC) e inmunohistoquímica (IHC‑P), puede ser necesaria la recuperación de antígeno (por ejemplo, recuperación de epítopos inducida por calor en tampón de citrato pH 6,0) y el bloqueo de la actividad peroxidasa endógena. Optimice la concentración del anticuerpo primario y las condiciones de incubación.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede usarse como anticuerpo de captura o detección. Se recomienda emparejarlo con un ligando o conjunto de anticuerpos validados; confirme la especificidad con la proteína recombinante CD117.

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