Anticuerpo policlonal anti-CD117/c-Kit para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P10721

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit, también conocido como receptor Kit del factor de crecimiento de mastocitos/células madre, es una tirosina cinasa receptora codificada por el protooncogén KIT. Es una glicoproteína transmembrana de un solo paso perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas.
• Al unirse a su ligando, el factor de células madre (KITLG/SCF), Kit se dimeriza y activa múltiples cascadas de señalización posteriores, incluidas las vías PI3K-AKT, RAS-MAPK y JAK-STAT, regulando la supervivencia, proliferación y diferenciación celulares.
• Kit desempeña funciones esenciales en la hematopoyesis, el mantenimiento de las células madre, la gametogénesis, la melanogénesis y el desarrollo y funcionamiento de los mastocitos.
• El Kit activado fosforila numerosos sustratos, incluidos PIK3R1, PLCG1, SH2B2, CBL y factores de transcripción STAT, lo que conduce a diversas respuestas celulares.
• El receptor se localiza principalmente en la membrana celular, aunque también puede encontrarse en el citoplasma.
• En el testículo, Kit se expresa en las espermatogonias, las células de Leydig intersticiales y los espermatozoides eyaculados, pero no en las células de Sertoli ni en los espermatocitos (PubMed:20601678). Referencias relacionadas: PMID:20601678
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, ubiquitinación y glicosilación, que regulan la actividad y estabilidad del receptor.
• Las mutaciones en KIT están asociadas con el piebaldismo, la mastocitosis, los tumores del estroma gastrointestinal y otras neoplasias malignas, lo que destaca su papel en la oncogénesis.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 210-412 de CD117/c-Kit humano. Esta región forma parte del dominio extracelular, por lo que puede ser adecuada para reconocer las formas nativas del receptor en el análisis por Western blot y la inmunofluorescencia.
• Para el análisis por Western blot (WB), el peso molecular previsto del Kit no glicosilado es de aproximadamente 110 kDa, pero la glicoproteína madura suele migrar a pesos moleculares superiores (aproximadamente 145 kDa) en condiciones reductoras. Valide los resultados en su muestra.
• Este anticuerpo policlonal reconoce el Kit humano, de ratón y de rata. Considere realizar pruebas de reactividad cruzada con otras especies si fuera necesario.
• Kit se expresa en la membrana y el citoplasma; por lo tanto, es necesario permeabilizar las células para la inmunofluorescencia o la inmunohistoquímica con el fin de detectar las reservas intracelulares.
• Para IHC-P, considere la recuperación antigénica y optimice las condiciones de dilución y detección según el tipo de tejido y el protocolo de fijación.
• El anticuerpo puede utilizarse para estudiar la señalización de Kit en células madre, melanoma, mastocitos o tumores del estroma gastrointestinal. Valide su uso en sistemas modelo pertinentes.

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