Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD117/c-Kit para WB, ELISA - P05532

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD117/c-Kit

• Identidad de la proteína: CD117/c-Kit es el receptor Kit del factor de crecimiento de mastocitos/células madre, una tirosina cinasa receptora codificada por el gen Kit (GeneID de ratón: 16590). También se conoce como protooncogén c-Kit.
• Función principal: Actúa como receptor de superficie celular para la citocina KITLG/SCF y desempeña funciones esenciales en la supervivencia y proliferación celular, la hematopoyesis, el mantenimiento de las células madre, la gametogénesis, el desarrollo, la migración y la función de los mastocitos, así como la melanogénesis.
• Vías de señalización: Tras la unión de SCF, KIT activa múltiples cascadas de señalización, incluidas las vías PI3K/AKT, RAS/MAPK, la movilización de calcio mediada por PLCγ y las vías JAK/STAT. Fosforila adaptadores y enzimas clave como PIK3R1, PLCG1, CBL y SRC.
• Isoformas y especificidad tisular: El corte y empalme alternativo genera varias isoformas. La isoforma 1 se expresa ampliamente (hígado fetal, médula ósea). La isoforma 3 está enriquecida en células madre hematopoyéticas. La detección a nivel proteico muestra las isoformas 1 y 2 en la médula ósea, las espermatogonias y los espermatocitos; la isoforma 3 en espermátidas redondas y elongadas, así como en espermatozoides.
• Localización subcelular: Se localiza principalmente en la membrana celular; también se encuentra en el citoplasma.
• Modificaciones postraduccionales y características estructurales clave: El receptor es una glucoproteína con enlaces disulfuro, dominios de inmunoglobulina y un dominio de tirosina cinasa citoplasmático. Sufre fosforilación y ubiquitinación, que regulan la señalización y la degradación.
• Palabras clave: Protooncogén, tirosina-proteína cinasa, unión a ATP, unión a magnesio/metales, hélice transmembrana, conjugación Ubl, repetición, señal.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es una proteína recombinante correspondiente a CD117/c-Kit de ratón. Para Western blot, el peso molecular previsto de la proteína de longitud completa es de aproximadamente 109 kDa; normalmente se observa una banda de este tamaño. El peso de la proteína indicado también señala 23 kDa, lo que posiblemente representa el fragmento recombinante.
• Al realizar WB, considere utilizar condiciones reductoras y controles positivos adecuados (por ejemplo, lisados de mastocitos de ratón o de células hematopoyéticas). La expresión endógena en los tejidos debe verificarse en el sistema de muestras correspondiente.
• Para ELISA, el inmunógeno recombinante puede utilizarse como antígeno de recubrimiento o estándar, pero las condiciones óptimas de recubrimiento y los rangos de detección deben determinarse empíricamente.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en su aplicación y matriz de muestra específicas, ya que las condiciones pueden afectar la especificidad y la sensibilidad.

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