Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-CD117/c-Kit para WB, FC, ELISA - P05532

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit es un receptor transmembrana simple de tirosina quinasa que se une específicamente al factor de células madre (KITLG/SCF).
• Desempeña un papel regulador maestro en la hematopoyesis, el mantenimiento de células madre, la gametogénesis, el desarrollo de mastocitos y la melanogénesis.
• Tras la unión al ligando, KIT activa múltiples cascadas intracelulares, incluidas las vías PI3K/AKT, RAS/MAPK y JAK/STAT, que gobiernan la supervivencia, proliferación y diferenciación celular.
• El receptor se localiza principalmente en la membrana celular, pero el KIT activado se internaliza rápidamente en el citoplasma para la atenuación o degradación de la señal.
• El splicing alternativo genera varias isoformas; la isoforma 3 se expresa predominantemente en células madre hematopoyéticas y células germinales postmeióticas, mientras que las isoformas 1 y 2 se encuentran en etapas espermatogénicas más tempranas y médula ósea.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación inducida por el ligando, la glicosilación enlazada a N y la ubiquitinación, que ajustan finamente la salida de la señal y el recambio del receptor.
• Clasificado como protooncogén, las mutaciones de ganancia de función en KIT están implicadas en tumores del estroma gastrointestinal, mastocitosis y otras neoplasias malignas.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting, se espera una banda principal de aproximadamente 109 kDa correspondiente al receptor de longitud completa; también puede detectarse un fragmento procesado de ~22 kDa dependiendo del tipo celular y las condiciones de lisis.
• Debido a que el inmunógeno abarca una gran porción del dominio extracelular, este anticuerpo es muy adecuado para la detección por citometría de flujo de CD117 superficial en células vivas de ratón no permeabilizadas.
• El rendimiento en ELISA debe optimizarse con un formato de captura adecuado; considere emparejarlo con un anticuerpo de detección que se una a un epitopo distinto para evitar la competencia.
• Valide la especificidad del anticuerpo usando un control positivo conocido (por ejemplo, células de médula ósea de ratón, líneas celulares de mastocitos) y un control negativo donde la expresión de CD117 está ausente o se ha disminuido por knockdown.

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