Anticuerpo policlonal de conejo Anti-CD11b (ITGAM) para WB, IHC-P, ELISA - P05555

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD11b

• La integrina alfa-M (CD11b), codificada por el gen Itgam, es un miembro de la familia de cadenas alfa de integrinas y se combina con la subunidad beta-2 (ITGB2/CD18) para formar el receptor de complemento CR3 (Mac-1). El empalme alternativo genera múltiples isoformas.
• La integrina ITGAM/ITGB2 media las interacciones adhesivas de monocitos, macrófagos y granulocitos, incluida la unión al fragmento iC3b del complemento C3 y facilita la captación de partículas y patógenos recubiertos de complemento (Por similitud).
• Más allá del complemento, CD11b actúa como receptor para fibrinógeno, factor X e ICAM1; reconoce motivos RGD y los péptidos P1/P2 de la cadena gamma del fibrinógeno, promoviendo así la adhesión y migración de leucocitos.
• El receptor desempeña un papel central en la migración de neutrófilos y, junto con CD18, es necesario para la activación mediada por CD177-PRTN3 de los neutrófilos estimulados por TNF (Por similitud).
• Puede regular la apoptosis inducida por fagocitosis en neutrófilos extravasados, contribuyendo a la resolución de la inflamación (Por similitud).
• En el cerebro, CD11b se requiere junto con TYROBP/DAP12 en la microglía para la producción de iones superóxido que impulsan la apoptosis neuronal del desarrollo. Referencias relacionadas: PMID:18685038
• Subcelularmente, CD11b se localiza en la membrana celular y se enriquece en las balsas de membrana.
• La expresión específica de tejido se observa predominantemente en monocitos, granulocitos, un subconjunto de mastocitos peritoneales y microglía.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo corresponde a los aminoácidos 143–337 de la CD11b de ratón, cubriendo una porción de la región N-terminal extracelular. Este diseño puede permitir el reconocimiento de conformaciones proteicas nativas y desnaturalizadas, por lo que es adecuado para Western blot, inmunohistoquímica y ELISA.
• Para el análisis por Western blot, CD11b migra aproximadamente a 127 kDa. Considere utilizar un gel SDS-PAGE de 6–12% y controles positivos adecuados (por ejemplo, lisados de macrófagos o granulocitos) para verificar la especificidad.
• Debido a la glicosilación predicha y la estructura unida por enlaces disulfuro, las condiciones reductoras y la preparación de muestra optimizada pueden influir en la detección. Valide el anticuerpo en el sistema de muestra correspondiente para confirmar su rendimiento.
• Se informa que este anticuerpo presenta reactividad cruzada con CD11b de humano y rata; sin embargo, las diferencias de secuencia pueden afectar la afinidad en estas especies, por lo que se recomienda una validación independiente en la especie objetivo.
• Para aplicaciones de IHC-P, los protocolos de recuperación de antígeno y los métodos de fijación de tejido deben optimizarse para el tipo de muestra específico para lograr la mejor relación señal-ruido.
• En ELISA, el anticuerpo se puede utilizar para la captura o detección de CD11b; considere emparejarlo con un anticuerpo monoclonal compatible en un formato de ELISA sándwich para aumentar la sensibilidad.

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