Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-CD14 para WB - P10810

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del CD14

• El antígeno de diferenciación de monocitos CD14 (CD14), también conocido como glucoproteína rica en leucina específica de células mieloides, es una glucoproteína de membrana anclada al fosfatidilinositol glicosilado (GPI) que pertenece a la familia de repeticiones ricas en leucina (LRR).
• El CD14 actúa como un correceptor para el lipopolisacárido bacteriano (LPS) en concierto con la proteína de unión a LPS (LBP), entregando el LPS al complejo LY96/TLR4 para iniciar las respuestas inmunes innatas (PubMed:16148141).
  Referencias relacionadas:
  PMID:16148141
• La señalización descendente a través de MyD88, TIRAP y TRAF6 conduce a la activación de NF-kappa-B, la secreción de citoquinas y la respuesta inflamatoria (PubMed:15895089, PubMed:8612135).
  Referencias relacionadas:
  PMID:15895089, PMID:8612135
• El CD14 sirve como correceptor para los heterodímeros TLR2:TLR6 y TLR2:TLR1 en respuesta a lipopéptos diacilados y triacilados, respectivamente; estos complejos desencadenan señales desde la superficie celular y trafican hacia el aparato de Golgi de manera dependiente de balsas de lípidos.
• Como receptor accesorio, el CD14 se une a las lipoproteínas LprA, LprG y LpqH de M. tuberculosis en conjunto con TLR2 y TLR1, modulando las funciones de las células presentadoras de antígenos (PubMed:19362712).
  Referencias relacionadas:
  PMID:19362712
• El CD14 también se une a LDL electronegativa (LDL(-)) y media la liberación de citoquinas inducida por LDL(-).
• La localización subcelular incluye la membrana celular, las balsas de membrana, el aparato de Golgi y puede secretarse en una forma soluble.
• Detectado en macrófagos peritoneales, macrófagos alveolares pulmonares, macrófagos dendríticos y macrófagos pulmonares a nivel de proteína (PubMed:8612135, PubMed:19362712).
  Referencias relacionadas:
  PMID:8612135, PMID:19362712

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (residuos 18-345) del CD14 de ratón, que abarca la región de repeticiones ricas en leucina; este diseño puede ser útil para detectar tanto las formas unidas a membrana como solubles del CD14.
• Para la transferencia Western (Western blotting), el peso molecular predicho del CD14 es de aproximadamente 39 kDa; sin embargo, debido a la glicosilación, la banda observada puede correr ligeramente más alto. Considere el uso de un tampón de bloqueo y lisis adecuado para preservar los epítopos.
• La citometría de flujo se puede aplicar para analizar la expresión del CD14 en la superficie celular de macrófagos y monocitos; asegure el "gateo" adecuado y los controles de isotipo para muestras de ratón.
• ELISA puede ser adecuado para detectar CD14 soluble o estudiar interacciones de unión a LPS; optimice las condiciones de recubrimiento y los anticuerpos de detección para el formato de ensayo específico.
• Valide el anticuerpo en el sistema de muestra relevante, como macrófagos peritoneales de ratón o poblaciones de macrófagos pulmonares, para confirmar la reactividad y la especificidad.

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