Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-CD146/MCAM para WB, IHC-P, IF/ICC - P43121

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD146/MCAM

• CD146/MCAM (también conocido como MUC18, MelCAM, HEMCAM) es una glicoproteína de superficie celular codificada por el gen MCAM, perteneciente a la superfamilia de inmunoglobulinas de moléculas de adhesión.
• Media la adhesión célula-célula independiente de calcio y es crítica para mantener la integridad del monocapa endotelial en las uniones intercelulares.
• Su expresión en células de melanoma facilita las interacciones con el endotelio vascular, promoviendo la diseminación hematógena y la metástasis.
• Durante el desarrollo embrionario, CD146/MCAM puede funcionar como una molécula de adhesión en las células de la cresta neural migratorias.
• La interacción con el ligando desencadena la fosforilación de tirosina de FYN y PTK2/FAK1, junto con un aumento transitorio de calcio intracelular, lo que indica un papel en la transducción de señales.
• En tejidos adultos normales, la expresión de CD146/MCAM se limita en gran medida al músculo liso vascular y las células endoteliales.
• La proteína se expresa altamente en melanomas primarios avanzados y metastásicos, pero rara vez se detecta en nevos benignos, correlacionándose con la progresión tumoral.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación y glicosilación N-ligada, y la proteína contiene repeticiones tipo inmunoglobulina unidas por disulfuro y un dominio transmembrana.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aa 24-559) del CD146/MCAM humano, prediciendo la detección de la proteína de longitud completa y cualquier forma soluble liberada en muestras apropiadas.
• Para Western blot, la banda predicha es de ~72 kDa; sin embargo, debido a la glicosilación, el peso molecular observado puede ser mayor. Considere el uso de condiciones desnaturalizantes y reductoras.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), la localización en la membrana debe ser prominente; incluya una permeabilización adecuada si se van a acceder epítopos intracelulares, aunque la orientación al dominio extracelular puede permitir la tinción de células vivas.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), pueden ser necesarios métodos de recuperación de antígeno y optimización; se espera expresión en el endotelio vascular y el tejido de melanoma.
• Si bien ELISA se enumra como una aplicación, combínela con un anticuerpo de captura/detección adecuado; los usuarios finales deben validar el anticuerpo en su formato de ensayo específico.
• La reactividad cruzada se ha validado para humano; para otras especies, realice un análisis de homología de secuencia y verificación experimental.

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