Anticuerpo Monoclonal Biotinilado Anti-CD16 para FC - P08637 / O75015

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del CD16

• El CD16 es el receptor de baja afinidad de la región Fc gamma de inmunoglobulinas III-A (FCGR3A), también designado como CD16a, Fc-gamma RIII-alfa y FcRIIIa.
• Funciona como receptor para el fragmento Fc de la IgG, activado óptimamente por complejos de antígeno-IgG agrupados en la superficie celular para medir la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) sin unirse a la IgG monomérica libre. Referencias relacionadas: PMID:11711607 PMID:21768335 PMID:22023369
• En las células NK, la señalización mediada por CD16 implica la fosforilación de adaptadores que contienen ITAM, la activación de PI3K y una elevación sostenida del calcio intracelular, culminando en la liberación de citoquinas proinflamatorias y la desgranulación. Referencias relacionadas: PMID:1825220 PMID:23024279 PMID:2532305
• El CD16 desempeña un papel clave en la supervivencia y proliferación de las células NK, y en la generación de células NK adaptativas similares a la memoria con producción mejorada de IFN-γ y capacidad antiviral de ADCC. Referencias relacionadas: PMID:24412922 PMID:25786175 PMID:29967280 PMID:9916693
• El receptor también contribuye a la eficacia antitumoral de los anticuerpos monoclonales terapéuticos al medir la ADCC de células tumorales opsonizadas con IgG, observándose una mayor actividad con los anticuerpos IgG1 afucosilados. Referencias relacionadas: PMID:27670158 PMID:34485821 PMID:28566370
• El CD16 se expresa principalmente en la superficie de las células NK y un subconjunto de monocitos circulantes, y también se puede encontrar en una forma secretada. Referencias relacionadas: PMID:2526846 PMID:27670158
• Además, el CD16 está implicado en la patogénesis del virus del dengue mediante la mejora dependiente de anticuerpos, donde los anticuerpos IgG1 anti-dengue afucosilados facilitan la entrada viral en las células mieloides.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glicosilación N-ligada, la formación de enlaces disulfuro y la fosforilación, que regulan la función y la señalización del receptor.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aa 20-208) del CD16 humano, lo que sugiere que el anticuerpo reconoce un epítopo en esta región; verifique la reactividad con los isoformas FCGR3A (P08637) y FCGR3B (O75015) si es necesario.
• Para la citometría de flujo, utilice la etiqueta de biotina con reactivos secundarios de estreptavidina conjugados con fluoróforo; titular tanto el anticuerpo primario como el conjugado de estreptavidina para identificar las relaciones óptimas de señal-ruido.
• Incluya los controles de isotipo apropiados y los pasos de bloqueo de Fc para minimizar la unión inespecífica, especialmente al analizar células que expresan receptores de Fc como las células NK y los monocitos.
• Valide el anticuerpo en el sistema de muestra relevante (por ejemplo, células mononucleares de sangre periférica humana) y considere cuidadosamente los protocolos de fijación/permeabilización, ya que pueden afectar la accesibilidad del epítopo.

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